|
Nguyên liệu |
Thể tích, µl |
|
H2O |
9 |
|
Dung dịch đệm RT- PCR (Tris/HCl và KCl) |
1 |
|
OptiScript reverse transcriptase |
2 |
|
dNTP |
1 |
|
i-StarTaq DN A polymerase |
1 |
|
Mồi xuôi |
1 |
|
Mồi ngược |
1 |
|
Mẫu ARN |
4 |
|
Tổng cộng |
20 |
Mồi
Chiều
Chuỗi (5‘ - 3‘)
Kích thước, bp
DHV-1 Com F
Xuôi
AAG-AAG-GAG-AAA-ATY-[C hoặc T]-AAG-GAA-GG
467
...
...
...
Mọi chi tiết xin liên hệ: ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
Ngược
TTG-ATG-TCA-TAG-CCC-AAS- [C hoặc G]-ACA-GC
E.3. Chu trình nhân gen
Bước
Chu kỳ
Thời gian
Nhiệt độ, 0C
Bước 1
1 chu kỳ
...
...
...
Mọi chi tiết xin liên hệ: ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
45
Bước 2
1 chu kỳ
5 min
94
1 chu kỳ
20 s
94
...
...
...
Mọi chi tiết xin liên hệ: ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
30 s
52
40 chu kỳ
30 s
72
...
...
...
Mọi chi tiết xin liên hệ: ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
94
Bước 4
1 chu kỳ
5 min
72
Bước 5
1 chu kỳ
∞
4
...
...
...
Mọi chi tiết xin liên hệ: ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66
Chuẩn bị thạch agaroze 2 % pha trong dung dịch TAE 1X hoặc TBE 1X có ethidi bromua (10 µg/µl). Đổ thạch vào khuôn điện di có lược.
Thạch khô, rút lược ra và cho mẫu vào các giếng (8 µl sản phẩm PCR + 2 µl dung dịch tải).Sử dụng thang chuẩn (Marker) 100 bp trở lên.
Chú ý khi chạy PCR phải có mẫu đối chứng dương và mẫu đối chứng âm đi kèm (mẫu đối chứng âm có thể là nước).
E.5. Đọc kết quả
Mẫu dương tính: Xuất hiện vạch và có kích thước bằng kích thước mẫu đối chứng dương.Mẫu âm tính: Không có vạch.
E.6. Đánh giá kết quả
Có vi rút viêm gan vịt typ I trong mẫu bệnh phẩm nếu kết quả RT-PCR dương tính.
Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 8400-9:2011 về bệnh động vật - quy trình chẩn đoán – phần 9: bệnh viêm gan vịt typ I
| Số hiệu: | TCVN8400-9:2011 |
|---|---|
| Loại văn bản: | Tiêu chuẩn Việt Nam |
| Nơi ban hành: | *** |
| Người ký: | *** |
| Ngày ban hành: | 01/01/2011 |
| Ngày hiệu lực: | Đã biết |
| Tình trạng: | Đã biết |
Văn bản đang xem
Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 8400-9:2011 về bệnh động vật - quy trình chẩn đoán – phần 9: bệnh viêm gan vịt typ I
Chưa có Video
