5.3.2 Điều kiện trong hệ thống phản ứng sau cột

– tốc độ dòng của tác nhân oxy hoá (3.4): 0,3 ml/min;

– nhiệt độ phản ứng trong ống teflon thể tích 1 ml là 50 ⁰C;

– tốc độ dòng của tác nhân axit hoá [dung dịch axit axetic 1M (3.1)]: 0,4 ml/min.

5.3.3 Dựng đường chuẩn

Bơm các dung dịch PSP chuẩn nồng độ từ 0,1 mg/ml đến 1 mg/ml (3.6) vào HPLC. Dựng đường chuẩn dựa trên độ hấp thụ nhận được. Khi đường chuẩn tuyến tính và đi qua gốc tọa độ thì trong các lần phân tích sau này, chỉ sử dụng một dung dịch chuẩn có hàm lượng PSP gần với hàm lượng có trong mẫu. Đường chuẩn lúc này được xây dựng từ độ hấp thụ của dung dịch sử dụng và gốc toạ độ.

5.3.4 Xác định độc tố PSP

Bơm các dung dịch mẫu đã chuẩn bị theo 5.2 vào HPLC. Mỗi dung dịch mẫu được bơm 2 lần. Tính độ hấp thụ trung bình cho mỗi dung dịch mẫu theo diện tích pic tương ứng.

Bơm các dung dịch chuẩn vào HPLC với tần suất 2 h bơm 1 lần.

...

...

...

6.1 Hàm lượng của từng loại độc tố PSP (ngoại trừ độc tố nhóm C)

Hàm lượng của từng loại độc tố PSP (ngoại trừ độc tố nhóm C) trong mẫu thử nhuyễn thể hai mảnh vỏ, C_PSP, được tính bằng microgam trên 100 gam (mg/100 g) theo công thức sau:

                                        (1)

trong đó

A_S là độ hấp thụ trung bình của dung dịch mẫu thử, tính theo diện tích pic;

A_C là độ hấp thụ trung bình của dung dịch PSP chuẩn (3.10) có nồng độ C_C, tính theo diện tích pic;

C_C là nồng độ của dung dịch PSP chuẩn (3.10), tính bằng microgam trên mililit (mg/ml).

w_S là khối lượng mẫu thử, tính bằng gam (g);

V là thể tích dịch chiết thu được (xem 5.2.1.1) tương ứng với lượng mẫu thử đã lấy, tính bằng mililit (ml) (V=2 ml tương ứng với w_s= 1,0 g)

...

...

...

6.2 Hàm lượng độc tố PSP nhóm C

6.2.1 Hàm lượng độc tố C1

Hàm lượng độc tố C1 trong mẫu thử nhuyễn thể hai mảnh vỏ, C_C1, được tính bằng microgam trên 100 gam (mg/100 g) theo công thức sau:

                                                        (2)

trong đó

C₂ là hàm lượng độc tố GTX2 sau quá trình thủy phân (xem 5.2.2), tính bằng microgam trên mililit (mg/ml);

C₂₀ là hàm lượng độc tố GTX2 trước quá trình thủy phân, tính bằng microgam trên 100 gam (mg/100g).

6.2.2 Hàm lượng độc tố C2

Hàm lượng độc tố C2 trong mẫu thử nhuyễn thể hai mảnh vỏ, C_C2, được tính bằng microgam trên 100 gam (mg/100 g) theo công thức sau:

...

...

...

trong đó

C₃ là hàm lượng độc tố GTX3 sau quá trình thủy phân (xem 5.2.2), tính bằng microgam trên 100 gam (mg/100 g).

C₃₀ là hàm lượng độc tố GTX3 trước quá trình thủy phân, tính bằng microgam trên 100 gam (mg/100 g).

6.3 Hàm lượng độc tố PSP tổng số

Hàm lượng độc tố PSP tổng số trong thịt nhuyễn thể hai mảnh vỏ bằng tổng hàm lượng của các loại độc tố đã định lượng được.

7. Độ lặp lại và độ thu hồi

7.1 Độ lặp lại

Độ lệch chuẩn lặp lại, CV_s, tính theo độ hấp thụ của 2 lần bơm liên tiếp của cùng một dung dịch chuẩn phải nhỏ hơn 0,5 %.

7.2 Độ thu hồi

...

...

...

8. Báo cáo thử nghiệm

Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ:

a) mọi thông tin cần thiết về việc nhận biết đầy đủ mẫu thử;

b) phương pháp lấy mẫu đã sử dụng, nếu biết;

c) phương pháp thử đã sử dụng và viện dẫn tiêu chuẩn này;

d) mọi thao tác không được quy định trong tiêu chuẩn này, hoặc những điều được coi là tự chọn, và bất kỳ chi tiết nào có ảnh hưởng tới kết quả;

e) kết quả thử nghiệm thu được.

THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO

...

...

...

Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 8339:2010 về nhuyễn thể hai mảnh vỏ - Xác định hàm lượng độc tố gây liệt cơ (PSP) - Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao