Trong đó:

w_3-MCPD(A) là phần khối lượng của 3-MCPD trong phép thử A, tính bằng miligam trên kilogam (mg/kg);

w_d5-3-MCPD(A) là phần khối lượng của d₅-3-MCPD trong phép thử A, tính bằng miligam trên kilogam (mg/kg);

SF_A là diện tích của 3-MCPD trong phép thử A;

SF_iA là diện tích của d₅-3-MCPD trong phép thử A.

9.2  Tiến hành định lượng 3-MCPD liên kết bằng cách nhân tỷ số diện tích tín hiệu của chất phân tích và chất chuẩn đồng hình được đánh dấu đồng vị, dựa trên các vết ion tương ứng với mức thêm chất chuẩn đồng hình được đánh dấu đồng vị trong phép thử B, tính theo Công thức (2):

(2)

Trong đó:

w_3-MCPD(B) là phần khối lượng của 3-MCPD trong phép thử, tính bằng miligam trên kilogam (mg/kg);

...

...

...

SF_b là diện tích của 3-MCPD trong phép thử B;

SF_iB là diện tích của d₅-3-MCPD trong phép thử B.

Báo cáo kết quả đến một chữ số thập phân.

9.3  Có thể xác định hệ số chuyển hóa mà lượng 3-MCPD được tạo thành từ glycidol trong các điều kiện phản ứng quy định bằng cách hiệu chuẩn nền mẫu với sự có mặt clorua (phép thử A). Do vậy, mẫu dầu hoặc mẫu chất béo không bị nhiễm được tiến hành theo Điều 7 (phép thử A) sau khi thêm chuẩn các lượng glycidol khác nhau (ví dụ: glycidyl stearat) sao cho có thể tạo ra các mức nồng độ cách đều nhau. Giá trị nghịch đảo của đường chuẩn hiệu chuẩn y = mx + n bằng với hệ số chuyển đổi t; tính được theo Công thức (3):

t =

1

(3)

m

Trong đó:

...

...

...

x là phần khối lượng của w_glycidol;

m là độ dốc của đường cong;

n là giao điểm y.

9.4  Hàm lượng glycidol, w_glycidol, là chênh lệch của kết quả thu được trong Công thức (1) và Công thức (2) nhân với hệ số chuyển đổi t [theo Công thức (3)], nêu trong Công thức (4):

w_glycidol = t x [w_3-MCPD(A) - w_3-MCPD(B)]

 (4)

Trong đó:

w_glycidol là phần khối lượng của glycidol trong mẫu, tính bằng miligam trên kilogam (mg/kg).

10  Độ chụm

...

...

...

Chi tiết của phép thử liên phòng thử nghiệm về độ chụm của phương pháp được nêu trong Phụ lục A. Các giá trị thu được từ phép thử liên phòng thử nghiệm này có thể không áp dụng cho các dải nồng độ và nền mẫu khác với các dải nồng độ và các nền mẫu đã nêu.

10.2  Độ lặp lại

Chênh lệch tuyệt đối giữa hai kết quả thử độc lập, riêng rẽ thu được khi sử dụng cùng phương pháp, tiến hành trên vật liệu thử giống hệt nhau, trong cùng một phòng thử nghiệm, do một người thực hiện, sử dụng cùng thiết bị, trong một khoảng thời gian ngắn, không được quá 5 % các trường hợp lớn hơn độ lặp lại r nêu trong Bảng A.1.

10.3  Độ tái lập

Chênh lệch tuyệt đối giữa hai kết quả thử riêng rẽ, thu được khi sử dụng cùng phương pháp, tiến hành thử trên vật liệu thử giống hệt nhau, trong các phòng thử nghiệm khác nhau, do những người khác nhau thực hiện, sử dụng các thiết bị khác nhau, không được quá 5 % các trường hợp lớn hơn độ tái lập R nêu trong Bảng A.1.

11  Báo cáo thử nghiệm

Báo cáo thử nghiệm phải bao gồm các thông tin sau:

a) mọi thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ về mẫu thử;

b) phương pháp lấy mẫu đã sử dụng, nếu biết

...

...

...

d) kết quả thu được;

e) kết quả thử nghiệm thu được hoặc nếu kiểm tra độ lặp lại thì nêu kết quả cuối cùng thu được

f) mọi điều kiện thao tác không quy định trong tiêu chuẩn này hoặc được xem là tùy chọn, cùng với mọi tình huống bất thường có thể ảnh hưởng đến kết quả.

CHÚ Ý - Để xác định lượng chính xác 3-MCPD, chỉ sử dụng phép thử B, còn phép thử A để xác định tổng lượng 3-MCPD và glycidol. Phương pháp này cần nêu rõ 3-MCPD tạo thành dựa trên phép thử A hoặc phép thử B.

Phụ lục A

(Tham khảo)

Kết quả của phép thử cộng tác

Độ chụm của phương pháp là kết quả của nghiên cứu liên phòng thử nghiệm được Ủy ban liên hợp của DIN và DGF tổ chức để phân tích dầu, mỡ, sản phẩm chất béo, các sản phẩm liên quan và các nguyên liệu thô. Nghiên cứu đã được tiến hành năm 2010 trên sáu mẫu sau.

...

...

...

- A dầu hạt cải siêu nguyên chất;

- B dầu mầm ngô, tinh luyện;

- C mỡ dùng để chiên rán (chất béo đã hydro hóa);

- D dầu óc chó/dầu hạt nho nguyên chất tinh luyện;

- E dầu đậu tương/dầu hạt hướng dương;

- F mẫu A có bổ sung 3 mg/kg 3-MCPD tự do.

Việc đánh giá kết quả đã được tiến hành theo TCVN 6910-2 (ISO 5725-2). Các kết quả đối với mẫu A đến mẫu F được nêu trong Bảng A.1 và Bảng A.2.

Bảng A.1 - Tóm tắt kết quả thống kê đối với phép thử A

Đơn vị tính là mg/kg

...

...

...

A

B

C

D

E

F

Số lượng phòng thử nghiệm tham gia

13

13

...

...

...

13

13

13

Số lượng phòng thử nghiệm còn lại sau khi trừ ngoại lệ

12

12

13

13

13

...

...

...

Số lượng phép thử riêng rẽ trong tất cả các phòng thử nghiệm trên từng mẫu

24

24

26

26

26

18

Giá trị trung bình, m

0,08

...

...

...

5,35

10,33

1,07

2,66

Độ lệch chuẩn lặp lại, s_r

0,02

0,06

0,23

0,23

...

...

...

0,10

Hệ số biến thiên lặp lại, C_V,r (%)

25,6

4,6

4,4

2,3

8,1

3,9

Giới hạn lặp lại, r (2,8 s_r)

...

...

...

0,15

0,66

0,65

0,24

0,29

Độ lệch chuẩn tái lập, s_r

0,10

0,27

0,97

...

...

...

0,21

0,45

Hệ số biến thiên tái lập, C_V,R (%)

131,7

22,6

18,2

14,6

20,0

16,9

...

...

...

0,29

0,77

2,72

4,23

0,60

1,26

Bảng A.2 - Tóm tắt kết quả thống kê đối với phép thử

Đơn vị tính là mg/kg

Mẫu 3-MCPD

...

...

...

B

C

D

E

F

Số lượng phòng thử nghiệm tham gia

13

13

13

...

...

...

13

13

Số lượng phòng thử nghiệm còn lại sau khi trừ ngoại lệ

12

13

13

13

12

12

...

...

...

24

26

26

26

24

24

Giá trị trung bình, m

0,09

0,46

...

...

...

8,12

0,62

2,37

Độ lệch chuẩn lặp lại, s_r

0,04

0,07

0,11

0,22

0,04

...

...

...

Hệ số biến thiên lặp lại, C_V,r (%)

44,5

14,7

4,7

2,7

5,7

7,3

Giới hạn lặp lại, r (2,8 s_r)

0,11

...

...

...

0,30

0,62

0,10

0,48

Độ lệch chuẩn tái lập, s_r

0,12

0,17

0,54

1,41

...

...

...

0,57

Hệ số biến thiên tái lập, C_V,R (%)

130,9

37,7

23,6

17,4

28,5

24,1

Giới hạn tái lập, R (2,8 s_r)

...

...

...

0,48

1,52

3,95

0,50

1,60

Thư mục tài liệu tham khảo

[1] TCVN 6128 (ISO 661), Dầu mỡ động vật và thực vật - Chuẩn bị mẫu thử.

[2] TCVN 2625 (ISO 5555), Dầu mỡ động vật và thực vật - Lấy mẫu.

...

...

...

[4] Kuhlmann J. Determination of bound 2,3-epoxy-1-propanol (glycidol) and bound monochloropropanediol (MCPD) in refined oils. Eur. J. Lipid Sci. Technol. 2011, 113 pp. 335-344

[5] Ermacora A.& Hrnčiřik K. A novel method for simultaneous monitoring of 2-MCPD, 3-MCPD and glycidyl esters in oils and fats. J. Am. Oil Chem. Soc. 2013, 90 pp. 1-8

[6] Deutsche Gesellschaft fur Fettwissenschaft (DGF). DGF Standard Method C-VI 18 (10) Fatty-acid bound 3-chloropropane-1,2-diol (3-MCPD) and 2,3-epoxipropane-1-ol (glycidol). Determination in oils and fats by GC-MS (Differential measurement). Deutsche Einheitsmethoden zur Untersuchung von Fetten, Fettprodukten, Tensiden und verwandten Stoffen, 2011b.

[7] Official Method Cd AOCS 29c-13, Approved 2013, Fatty-acid-bound 3-chloropropane-1,2,diol (3- MCPD) and 2,3-epoxi-propane-1-ol (glycidol), Determination in Oils and Fats by GC-MS (Differential Measurement)

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 12081-1:2017 (ISO 18363-1:2015) về Dầu mỡ động vật và thực vật - Xác định các chloropropanediol (MCPD) liên kết với axit béo và glycidol bằng sắc ký khối phổ (GC/MS) - Phần 1: Phương pháp sử dụng sự chuyển hoá este kiềm nhanh, đo 3-MCPD và phép đo vi sai glycidol