3.2. Yêu cầu về hàm lượng hoạt chất

3.2.1. Oxolinic acid kỹ thuật

Hàm lượng oxolinic acid phải được công bố không nhỏ hơn 93% và khi xác định, hàm lượng trung bình không nhỏ hơn mức hàm lượng tối thiểu đã công bố.

3.2.2. Oxolinic acid thành phẩm

Hàm lượng oxolinic acid (tính theo %, g/kg hoặc g/l ở 20 ^oC ± 2 ^oC) phải được công bố và phù hợp với mức sai lệch cho phép của hàm lượng hoạt chất được quy định trong Bảng 2.

Bảng 2 – Hàm lượng oxolinic acid trong các dạng thành phẩm

Hàm lượng hoạt chất công bố (ở 20 ± 2 ^oC)

Mức sai lệch cho phép

%

...

...

...

Đến 2,5

Đến 25

± 25% đối với dạng không đồng nhất (WP…)

Từ trên 2,5 đến 10

Từ trên 25 đến 100

± 10% của hàm lượng công bố

Từ trên 10 đến 25

Từ trên 100 đến 250

± 6% của hàm lượng công bố

...

...

...

Từ trên 250 đến 500

± 5% của hàm lượng công bố

Lớn hơn 50

-

± 2,5%

-

Lớn hơn 500

± 25 g/kg

3.3. Yêu cầu về tính chất lý – hóa đối với thuốc bảo vệ thực vật dạng bột thấm nước có chứa oxolinic acid

...

...

...

Sản phẩm sau khi tạo huyền phù với nước cứng chuẩn ở 30 ± 2 ^oC trong 30 min, hàm lượng oxolinic acid trong dung dịch huyền phù: không nhỏ hơn 60%

3.3.2. Độ mịn

Lượng cặn còn lại trên rây có đường kính lỗ 75 μm sai khi thử rây ướt: không lớn hơn 2%.

3.3.3. Độ bọt

Thể tích bọt tạo thành sau 1 min: không lớn hơn 60 ml.

3.3.4. Độ thấm ướt

Sản phẩm được thấm ướt hoàn toàn trong 1 min mà không cần khuấy trộn.

3.3.5. Độ bền bảo quản ở nhiệt độ cao

Sản phẩm sau khi bảo quản ở nhiệt độ 54 ± 2 ^oC trong 14 ngày có hàm lượng hoạt chất xác định được theo 4.2 không nhỏ hơn 95% so với trước khi bảo quản và phù hợp với quy định trong 3.3.1; 3.3.2 và 3.3.4.

...

...

...

4.1. Lấy mẫu

Lấy mẫu theo Phụ lục A của TCVN 8143:2009.

4.2. Xác định hàm lượng hoạt chất

4.2.1. Nguyên tắc

Hàm lượng oxolinic acid được xác định bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) với detector tử ngoại (UV). Kết quả được tính dựa trên sự so sánh giữa số đo diện tích pic mẫu thử và số đo diện tích píc mẫu chuẩn.

4.2.2. Thuốc thử

Chỉ sử dụng các thuốc thử tinh khiết phân tích, nước ít nhất đạt loại 3 của TCVN 4851 (ISO 3696) trừ khi có quy định khác.

4.2.2.1. Chất chuẩn oxolinic acid, đã biết hàm lượng

4.2.2.2. Metanol, dùng cho HPLC

...

...

...

4.2.2.4. Axit clohydric, 36%

4.2.2.5. Dimethyl sulfoxide, 99,5%

4.2.2.6. Dung dịch đệm: Dùng axit photphoric 85% (4.2.2.3) để điều chỉnh nước cất đến pH = 2,6

4.2.2.7. Dung dịch pha mẫu axit clohydric-dimethyl sulfoxide: Cho từ từ 10 ml axit clohydric (4.2.2.4) vào cốc 1000 ml có chứa 500 ml dimethyl sulfoxide (4.2.2.5), trộn đều dung dịch.

4.2.2.8. Dung dịch chuẩn làm việc

Dùng cân phân tích (4.2.3.7) cân 0,1 g chất chuẩn oxolinic acid (4.2.2.1), chính xác đến 0,0001 vào bình định mức 100 ml, thêm 90 ml dung dịch pha mẫu (4.2.2.7), lắc siêu âm trong bể ổn nhiệt 60^oC trong 30 min, làm lạnh đến nhiệt độ phòng và định mức đến vạch bằng dung dịch pha mẫu (4.2.2.7) – dung dịch A.

Dùng pipet (4.2.3.3) hút chính xác 1 ml dung dịch A vào bình định mức 20 ml, thêm 9 ml methanol (4.2.2.2) và định mức đến vạch bằng nước cất. Đặt vào máy lắc siêu âm để đuổi bọt khí trước khi bơm vào máy.

CHÚ THÍCH: Chất chuẩn bảo quản trong tủ lạnh phải được đưa về nhiệt độ phòng trước khi cân.

4.2.3. Dụng cụ, thiết bị

...

...

...

4.2.3.1. Cốc thủy tinh, dung tích 1000 ml.

4.2.3.2. Bình định mức, dung tích 10;20,100 ml.

4.2.3.3. Pipet, dung tích 1;10 ml.

4.2.3.4. Xyranh bơm mẫu, dung tích 50 μm, chia vạch đến 1 μl, hoặc bơm mẫu tự động

4.2.3.5. Màng lọc, có kích thước lỗ 0,45 μm.

4.2.3.6. Máy lắc siêu âm.

4.2.3.7. Cân phân tích, có thể cân chính xác đến 0,0001 g.

4.2.3.8. Máy đo pH

4.2.3.9. Thiết bị sắc ký lỏng hiệu năng cao, được trang bị như sau:

...

...

...

- Máy tích phân hoặc máy vi tính

- Cột RP 18, 150 mm, đường kính 4,6 mm, cỡ hạt pha tĩnh 5 μm hoặc loại tương đương

- Bộ bơm mẫu tự động hoặc bơm mẫu bằng tay.

4.2.4. Cách tiến hành

4.2.4.1. Chuẩn bị mẫu

Mẫu cần được làm đồng nhất trước khi cân.

4.2.4.2. Chuẩn bị dung dịch mẫu thử

Dùng cân phân tích (4.2.3.7) cân mẫu thử chứa khoảng 0,1 g hoạt chất oxolinic acid, chính xác đến 0,0001 g vào bình định mức 100 ml, thêm 90 ml dung dịch pha mẫu (4.2.2.7), lắc siêu âm trong bể ổn nhiệt 60^oC trong 30 min, làm lạnh đến nhiệt độ phòng và định mức đến vạch bằng dung dịch pha mẫu (4.2.2.7) – Dung dịch B.

Dùng pipet hút chính xác 1 ml dung dịch B vào bình định mức 20 ml, thêm 9 ml methanol (4.2.2.2) và định mức đến vạch bằng nước cất. Lọc dung dịch qua màng lọc 0,45 μm (nếu cần). Đặt vào máy lắc siêu âm để đuổi bọt khí trước khi bơm vào máy.

...

...

...

Pha động: dung dịch đệm (4.2.2.6): metanol (4.2.2.2) = 60:40 (theo thể tích)

Bước sóng: 330 nm

Tốc độ dòng: 1 ml/min

Thể tích vòng bơm: 20 μl

4.2.4.4. Xác định

Bơm dung dịch chuẩn làm việc (4.2.2.8) cho đến khi số đo diện tích của pic mẫu chuẩn thay đổi không lớn hơn 1%. Sau đó, bơm lần lượt dung dịch chuẩn làm việc (4.2.2.8) và dung dịch mẫu thử (4.2.4.2), lặp lại 2 lần (số đo diện tích của pic mẫu chuẩn thay đổi không lớn hơn 1% so với giá trị ban đầu).

4.2.4.5. Tính kết quả

Hàm lượng hoạt chất oxolinic acid trong mẫu, X, biểu thị bằng phần trăm khối lượng (%) được tính theo công thức:

...

...

...

S_m là số đo diện tích của pic mẫu thử;

S_c là số đo diện tích của pic mẫu chuẩn;

m_c là khối lượng mẫu chuẩn, tính bằng gam (g);

m_m là khối lượng mẫu thử, tính bằng gam (g);

P là độ tinh khiết của chất chuẩn, tính bằng phần trăm (%).

4.3. Xác định tỷ suất lơ lửng

Cân lượng mẫu thử đủ để pha 250 ml dung dịch huyền phù có nồng độ tương ứng với nồng độ sử dụng.

Xác định tỷ suất lơ lửng theo TCVN 8050:2009, trong đó khối lượng hoạt chất oxolinic acid trong 25 ml dung dịch còn lại dưới đáy ống đong được xác định theo (4.2) và bổ sung như sau:

4.3.1. Chuẩn bị dung dịch mẫu thử

...

...

...

4.3.2. Chuẩn bị dung dịch chuẩn làm việc

Tùy theo nồng độ hoạt chất sử dụng ghi trên nhãn của từng sản phẩm để chuẩn bị dung dịch chuẩn làm việc có nồng độ tương đương với nồng độ dung dịch mẫu thử (4.3.1).

4.3.3. Tính kết quả

Tỷ suất lơ lửng, Y, biểu thị bằng phần trăm (%) được tính theo công thức:

Trong đó

1,11 là hệ số tỷ lệ của thể tích toàn cột chất lỏng (250 ml) với thể tích dung dịch phía trên được hút ra (225 ml);

c là khối lượng hoạt chất oxolinic acid trong toàn ống đong, tính bằng gam (g)

...

...

...

b là khối lượng mẫu chuyển vào ống đong 250 ml, tính bằng gam (g);

q là khối lượng hoạt chất oxolinic acid trong 25 ml còn lại dưới đáy ống đong, tính bằng gam (g)

S_m là số đo diện tích của pic mẫu thử;

S_c là số đo diện tích của pic mẫu chuẩn;

N_c là nồng độ của dung dịch chuẩn, tính bằng gam trên mililít (g/ml);

P là độ tinh khiết của chất chuẩn, tính bằng phần trăm (%);

100 là thể tích pha loãng 25 ml dung dịch dưới đáy ống đong, tính bằng mililit (ml).

4.4. Xác định độ mịn, độ bọt, độ thấm ướt

...

...

...

4.5. Xác định độ bền bảo quản ở nhiệt độ cao

Xác định độ bền bảo quản ở nhiệt độ cao theo TCVN 2741.

PHỤ LỤC A

(tham khảo)

GIỚI THIỆU HOẠT CHẤT OXOLINIC ACID

A1. Công thức cấu tạo:

A2. Tên hoạt chất: oxolinic acid

...

...

...

A4. Công thức phân tử: C₁₃H₁₁NO₅

A5. Khối lượng phân tử:            261,2

A6. Nhiệt độ nóng chảy: > 250 ^oC

A7. Độ hòa tan (mg/l, ở 25 ^oC) trong:

            Nước                3,2 mg/l

Trong dung môi hữu cơ (g/kg, ở 20 ^oC)

            Metanol                        < 10

            Xylene              < 10

            Hexan               < 10

...

...

...

THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO

[1] 10 TCN 504-202 Thuốc trừ bệnh chứa hoạt chất Oxolinic acid – Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử, 1998

[2] CDS Tomlin, The Pesticide Manual, Thirteeth Edition, 2003

[3] Manual on the development and use of FAO and WHO specification for pesticides, First Edition, 2006

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 10164:2013 về Thuốc bảo vệ thực vật chứa hoạt chất Oxolinic Acid - Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử