4.3.2. Chuẩn bị mẫu thử

4.3.2.1. Bước 1 - Chiết lọc

- Cân 10 ± 0,001gam mẫu đã được chuẩn bị theo 10 TCN 301-2005 cho vào cốc 250ml, hoà tan bằng 50ml nước nóng 50±5^oC, khuấy đều 30 phút ở nhiệt độ 50±5^oC.

- Lọc qua giấy lọc khô, thu lấy dịch lọc vào bình định mức 100ml (rửa cốc và que khuấy bằng nước cất vào phễu lọc), thêm nước cất tới vạch định mức 100ml - gọi đây là dung dịch A.

- Chuẩn bị đồng thời hai mẫu trắng cùng điều kiện mẫu thử

4.3.2.2. Bước 2 - Trao đổi

- Lấy 25ml dung dịch A, cho chảy qua cột trao đổi cation, hiệu chỉnh tốc độ trao đổi từ 4 đến 5ml/phút, thu dung dịch vào bình định mức 100ml.

- Sau khi dung dịch A trên cột đã rút hết, rửa bằng 25ml nước cất, thu dung dịch và nước rửa vào bình định mức, tốc độ rửa từ 4 đến 5ml/phút.

- Thêm 2 giọt chỉ thị metyl đỏ và nhỏ từng giọt 0,1N NaOH trung hoà cho đến khi dung dịch chuyển sang mầu vàng, axit hoá bằng dung dịch 0,1N H₂SO₄ cho đến khi dung dịch chuyển sang mầu hồng.

...

...

...

4.3.2.3. Bước 3 - Tạo phức

- Lấy 50ml dung dịch B cho vào bình định mức 100ml

- Thêm vào mỗi bình 20ml dung dịch kali-natri tartrat

- Thêm vào mỗi bình 20ml dung dịch đồng sunphat

- Thêm nước cất tới vạch định mức 100ml, lắc đều khoảng 10 giây, rồi nhúng bình vào nồi cách thuỷ ở nhiệt độ 30±5^oC trong khoảng thời gian 15 phút (thỉnh thoảng lắc đều)

4.3.3. Xây dựng đường chuẩn

- Sử dụng dãy tiêu chuẩn đã chuẩn bị để xây dựng đường chuẩn

- Đo dung dịch dãy tiêu chuẩn tại bước sóng 550nm

- Vẽ đồ thị đường chuẩn biểu diễn tương quan giữa mật độ quang với nồng độ dung dịch biuret của dãy tiêu chuẩn (hoặc phương trình tương đương).

...

...

...

4.3.4. Đo dung dịch mẫu

- Đo các dung dịch mẫu, dung dịch mẫu trắng đã chuẩn bị cùng điều kiện đo dãy tiêu chuẩn.

- Căn cứ vào số đo mật độ quang dung dịch mẫu thử, dung dịch mẫu trắng và đồ thị đường chuẩn, xác định được nồng độ biuret trong dung dịch mẫu đo, từ đó suy ra hàm lượng biuret trong mẫu.

4.4. Tính toán kết quả

4.4.1. Công thức tính

- Hàm lượng biuret tính theo phần trăm khối lượng (% Biuret)

 % Biuret =

(a x V₄ x V₂ x V x 100)

(1000 x V₃ x V₁ x m x 1000)

...

...

...

 % Biuret =

a x V₄ x V₂ x V

V₃ x V₁ x m x 10000

Trong đó:

a- Nồng độ biuret trong dung dịch mẫu đo đã trừ mẫu trắng (mg/L)

V- Thể tích dung dịch chiết (ml) (100ml)

V₁- Thể tích dung dịch lấy để trao đổi cation (ml) (25ml)

V₂- Thể tích dung dịch sau khi trao đổi ( ml) (100ml)

V₃- Thể tích dung dịch lấy để tạo phức (ml) (50ml)

...

...

...

m- Khối lượng mẫu cân đem chiết (gam) (10gam)

Và các hệ số quy đổi đơn vị

4.4.2. Sai số phép đo

Kết quả phép thử kiểm tra chất lượng phân bón là giá trị trung bình của ít nhất hai lần thử lặp lại tiến hành song song, sai lệch kết quả giữa các lần lặp lại so với giá trị trung bình của phép thử không lớn hơn 0,5% giá trị tuyệt đối được chấp nhận.

Tiêu chuẩn ngành 10TCN 305:2005 về phân bón - Phương pháp xác định Biuret