8.3. Độ tái lập

Chênh lệch tuyệt đối giữa hai kết quả của hai phép thử độc lập, thu được khi tiến hành thử trên vật liệu giống nhau bởi hai phòng thử nghiệm khác nhau, không quá 5 % các trường hợp lớn hơn giới hạn tái lập R.

Các giá trị riboflavin là:

Sữa bột

 = 14,54 mg/100g

R = 3,0078 mg/100g

Gan lợn

 = 105,46 mg/100g

R = 23,5342 mg/100g

...

...

...

Báo cáo thử nghiệm phải bao gồm ít nhất các thông tin sau:

a) tên và chữ ký của người chịu trách nhiệm phân tích;

b) mọi thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ về mẫu thử;

c) viện dẫn tiêu chuẩn này hoặc phương pháp thử đã sử dụng;

d) ngày và quy trình lấy mẫu (nếu biết);

e) ngày nhận mẫu;

f) ngày thử nghiệm;

g) các kết quả và các đơn vị biểu thị kết quả;

h) các điểm đặc biệt quan sát được trong khi tiến hành thử nghiệm;

...

...

...

Phụ lục A

(tham khảo)

Sắc đồ

CHÚ DẪN

X: min

Y: độ hấp thụ

1: 6,380 vitamin B₂

...

...

...

Pha tĩnh: Supelco^® LC-18-DB, 5 mm, 250 mm x 4,6 mm

Pha động: metanol (4.2.1): đệm phosphat, pH 3,5 (4.2.16) có chứa tetraetyl amoniclorua 1 g/l (4.2.17) và natri heptansulfonat 5 mmol/l (4.2.18) (35:65)

Tốc độ dòng: 1,0 ml/min

Thể tích bơm: 20 ml

Detector: huỳnh quang; bước sóng kích thích: 468 nm; bước sóng phát xạ: 520 nm

Phụ lục B

(Tham khảo)

Dữ liệu về độ chụm

...

...

...

Bảng B.1 - Dữ liệu về độ chụm

Mẫu

Sữa bột, CRM 421

Gan lợn, CRM 487

Chất phân tích

Riboflavin

Riboflavin

Năm

1996

...

...

...

Số phòng thử nghiệm

13

11

Số mẫu

1

1

Số phòng thử nghiệm giữ lại sau khi loại trừ ngoại lệ

12

11

...

...

...

1

0

Số dữ liệu tập hợp

12

11

Số phép đo tái lặp

5

5

Giá trị trung bình, , mg/ 100g

...

...

...

105,46

Độ lệch chuẩn lặp lại, s_r, mg/100g

0,4611

1,8058

Độ lệch chuẩn tương đối lặp lại, %

3,17

1,71

Giá trị lặp lại, r[2,83.s_r], m/100g

1,3048

...

...

...

Độ lệch chuẩn tái lập, s_R, mg/100g

1,0628

8,3160

Độ lệch chuẩn tương đối tái lập, %

7,31

7,89

Giá trị tái lập, R[2,83.s_R], mg/100 g

3,0078

23,5342

...

...

...

Phụ lục C

(Tham khảo)

Các hệ thống HPLC thay thế

Việc tách và định lượng đã áp dụng thấy thỏa mãn nếu áp dụng các điều kiện sắc ký sau đây [10].

Bảng C.1 - Các hệ thống HPLC thay thế

Pha tĩnh

Kích thước cột mm x mm

Pha động

...

...

...

Detector huỳnh quang,
nm

Hypersil^® ODS, 5 mm

125 x 4,6

Metanol: nước (50:50)

1,0

Kích thích: 462

Phát xạ: 520

Supelco^® LC-18-DB, 5 mm

250 x 4,6

...

...

...

1,0

Kích thích: 468

Phát xạ: 520

Lichropher^® RP 18, 5 mm

25 x 4 +

125 x 4

Metanol: amoniac 0,025 % (+ 1 g axit hexansulfonat); (250:500); pH 3,6

1,5

Kích thích: 467

...

...

...

Apex^® C18, 3 mm

250 x 4

Metanol: nước (1:1)

1,0

Kích thích: 450

Phát xạ: 510

Bondapak^® C18 radialpak catridges

100 x 8

Metanol: 5 mmol điện phosphat pH 7 (35:65)

...

...

...

Kích thích: 440

Phát xạ: 520

Spherisorb^® ODS2, 5 mm

250 x 4,6

Metanol: nước (50:50)

1,0

Kích thích: 450

Phát xạ: 510

mBondapak^®C18, 10 mm

...

...

...

Metanol: đệm natri axetat 0,05 M, pH 4.5 (40:60)

1,0

Kích thích: 422

Phát xạ: 522

Kromasil^®C-18, 5 mm

250 x 4,6

Metanol: nước (40:60)

1,0

Kích thích: 440

...

...

...

Eurospher^® C18, 5 mm

250 x 4,6

Metanol: nước (50:50)

1,0

Kích thích: 445

 Phát xạ: 530

Spherisorb^® ODS, 5 mm

250 x 4,6

Metanol: nước (50:50)

...

...

...

Kích thích: 410

Phát xạ: 510

Spherisorb^® ODS, 5 mm

250 x 4,6

KH₂PO₄: axetonitril: metanol (60:10:30)

0,8

Kích thích: 450

Phát xạ: 520

...

...

...

[1] Lumley, I. D. and Wiggins, R. A.: Determination of riboflavin and flavin mononucleotide in foodstuffs using high-performance liquid chromatography and a column-enrichment technique. Analyst 106, 1981. 1103-1108.

[2] Finglas, Ρ.M. and Faulks, R.M: Critical review of HPLC method for the determination of thiamin, riboflavin and niacin in food. J. Micronutr. Anal. 3. 1987. 251-283.

[3] Ball, G. F. M, in G. F. M. Ball (Ed); Water-Souluble Vitamin Assays in Food Analysis. Elsevier Applied Science, London, 1994, 237-246.

[4] Hasselmann, C., Franck, D., Grimm, Ρ., Diop, PA. and Soules, C: High-performance liquid chromatographic analysis of thiamin and riboflavin in dietic foods. J. Micronutr. Anal. 5. 1989. 269-279.

[5] Ollilainen. V., Mattila Ρ., Vara. Ρ., Koivistolnen, Ρ. and Hutlunen. J.: The HPLC determination of total riboflavin in foods. J.Micronutr. Anal. 8. 1990,199-207.

[6] Hägg. M. and Kurnpulalnen, J.: Thiamin and riboflavin contents in domestic and imported cereal products in Finland. J. Food Comp. Anal. 6.1993. 299-306.

[7] Hägg. M.: Effect of various commercially available enzymes in the liquid chromatographic determination with external standardization of thiamin and riboflavin in foods. J. AOAC Int. 77. 1994. 681-686.

[8] Eitenmtller, R. R. and Landen. W. O.: Vitamin Analysis for the Health and Food Sciences. CRC Press, Boca Raton. London. New York, Washington, D.C., 1999, 299-337.

[9] Eurpean Pharmacopoeia 1997: 1997: 0292. Riboflavme. 1442-1443.

...

...

...

[11] Ndaw, S., Bergaenzle, M., Aoude-Werner. D., Hasselmann. C: Extraction procedures for the liquid chromatography determination of lhiamine, riboflavin and vitamin B₆, in foodstuffs. Food Chemistry 71, 2000, 129-138.

[1]⁾ Taka-Diastase Nr.T00040 là tên thương mại của sản phẩm được cung cấp bởi Pfaltz & Bauer, Waterbyry, CT 06708, Hoa Kì. Thông tin này đưa ra tạo thuận tiện cho người sử dụng tiêu chuẩn này và không ấn định phải sử dụng sản phẩm này. Các sản phẩm tương đương có thể được sử dụng nếu chúng đưa ra các kết quả tương tự.

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8975:2011 (EN 14152 : 2003, đính chính kỹ thuật 2005) về Thực phẩm - Xác định vitamin B2 bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC)