PHỤ LỤC C

PHA CHẾ MÔI TRƯỜNG, THUỐC NHUỘM

C1. Môi trường nước thịt:

- - Nước thịt bò                         1.000ml

- - Pepton                                 10g

- - Natri clorua                           5g

Hoà tan pepton và Natri clorua trong nước thịt bò đun sôi. Để nguội chỉnh pH 7,4 - 7,6. Chia vào các ống nghiệm mỗi ống 5 ml. Hấp 121^oC trong 20 phút.

Chú thích: Có thể dùng 5g bột cao thịt hoà tan trong 1.000 ml nước cất thay cho 1.000 ml nước thịt bò.

...

...

...

- Môi trường nước thịt (C1)                    1.000 ml

- Thạch                                                 18-20g

Hoà tan thạch vào môi trường nước thịt đun sôi. Để nguội chỉnh pH 7,4 - 7,6. Hấp 121^oC trong 20 phút. Chia vào các đĩa petri, mỗi đĩa 15 - 20 ml và vào các ống nghiệm, mỗi ống 5 ml, để ống nghiệm nằm nghiêng.

C3. Môi trường thạch máu:

- Môi trường thạch dinh dưỡng (C2)                               100 ml

- Máu thỏ hoặc máu cừu vô khuẩn (đã tách fibrin)           10 ml

Đun nóng cho tan môi trường thạch. Khi nhiệt độ xuống còn 45^oC thì cho máy vào trộn đều, chia vào các đĩa petri vô khuẩn, mỗi đĩa 15-20 ml

C4. Nước muối đẳng trương

- Natri clorua                 8,5g

...

...

...

Hòa tan Natri clorua. Hấp 121^oC trong 20 phút.

C5. Thuốc nhuộm gram.

C5.1. Dung dịch kết tinh tím (crystal violet)

- Kết tinh tím (crystal violet)                    2g

- Cồn 95^o                                               20 ml

C5.2.    Dung dịch ammonium oxalat.

- Ammonium oxalat (NH₄)₂C₂O₄. H₂O       0,8 g

- Nước cất                                            80 ml.

Hoà lẫn 2 dung dịch trên(C5.1, C5.2). Sau 24 giờ, lọc qua giấy lọc.

...

...

...

- Iod                                                     1g

- Kali iodua (KI)                                     2 g

- Nước cất                                300 ml

Hòa tan Kali iodua trong 5 ml nước, sau cho Iode vào, lắc mạnh cho tan rồi bổ xung phần nước còn lại.

C5.4. Dung dịch tẩy màu: Cồn 95^o

C5.5. Dung dịch safranin

- Safranin          0,25 g

- Cồn 95^o                     10 ml

- Nước cất        90 ml

...

...

...

C6. Thuốc nhuộm Wright

- Bột nhuộm Wright                               0,1 g

- Glycerin lỏng thuần khiết                      1 ml

- Methanol (CH₃OH)                               60 ml

Nghiền nhuyễn bột Wright trong glycerin bằng cối sứ, sau cho cồn vào. Đựng trong lọ màu sau 1 tuần đem lọc qua giấy. Bảo quản ở nơi tối trong lọ màu nâu

C7. Thuốc nhuộm giáp mô (Rabiger)

C7.1. Dung dịch kết tinh tím- formalin:

- Kết tinh tím (Crystal violet)       10 g

- Formalin                                 100 ml

...

...

...

C7.2     Dung dịch fuchsin basic:

- Fuchsin basic                          1 g

- Cồn 95^o                                   9 ml

- Nước cất                                90 ml

Hòa tan trước fuchsin basic trong cồn, sau dùng nước cất pha loãng

Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 5154:1990 về thịt và sản phẩm của thịt - phương pháp phát hiện Bacillus Anthracis do Ủy ban Khoa học Nhà nước ban hành