6.5  Chương trình rửa giải gradient

Chương trình rửa giải gradient dùng cho phân tích HPAEC-PAD sau đây cho thấy thích hợp:

Thời gian

min

Pha động A (3.10)

%

Pha động B (3.11)

%

00:00

...

...

...

30

10:00

0

100

15:00

70

30

20:00

kết thúc

...

...

...

6.6  Dựng đường chuẩn

Dựng đường chuẩn 8 điểm từ các dung dịch chuẩn làm việc polydextrose (3.12.4). Đường chuẩn này cần cho hồi quy đa thức với hệ số tương quan ≥ 95 %.

6.7  Xác định

Lọc phần nổi phía trên thu được từ 6.3 qua bộ lọc xyranh cỡ lỗ 0,2 µm (4.7) vào lọ lấy mẫu tự động. Bơm 25 µl qua thiết bị HPAEC (4.9). Phân tích mỗi mẫu thử lặp lại ba lần và xác định đáp ứng detector trung bình. Tính diện tích pic đối với thành phần polydextrose có khối lượng phân tử cao ở thời gian lưu khoảng 12 min.

Độ lệch chuẩn tương đối (RSD) tối đa là 5 %, nếu không thì lặp lại phép phân tích bằng HPAEC.

So sánh diện tích pic này với diện tích pic trên đường chuẩn (6.6). Nồng độ polydextrose phải nằm trong dải đường chuẩn. Nếu nồng độ polydextrose không nằm trong dải này thì thực hiện lại phép phân tích và điều chỉnh nồng độ của mẫu thử đầu tiên (6.2).

7  Tính kết quả

7.1  Nồng độ dung dịch chuẩn gốc polydextrose

Nồng độ dung dịch chuẩn gốc polydextrose (3.12.2), C₀, biểu thị bằng microgam trên gam (µg/g), được tính bằng Công thức (1):

...

...

...

(1)

Trong đó:

M  là khối lượng polydextrose đã cân (tính theo chất khô) (xem 3.12.2), tính bằng miligam (mg);

m  là khối lượng nước (xem 3.12.2), tính bằng gam (g);

1 000  là hệ số chuyển đổi miligam sang microgam.

7.2  Nồng độ của các dung dịch chuẩn làm việc polydextrose đã qua xử lý

Nồng độ của các dung dịch làm việc polydextrose đã qua xử lý (xem 6.3), C, biểu thị bằng microgam trên gam (µg/g), được tính bằng Công thức (2):

(2)

...

...

...

A₁  là khối lượng của 0,2 ml dung dịch chuẩn trung gian đã qua siêu lọc ly tâm (xem 6.3), tính bằng gam (g);

A₂  là khối lượng của 0,8 ml hỗn hợp đệm enzym đã thêm vào ống ly tâm 1,7 ml chứa dung dịch chuẩn trung gian đã qua siêu lọc ly tâm (xem 6.3), tính bằng gam (g);

C₁  là nồng độ dung dịch chuẩn trung gian chưa qua xử lý (3.12.3), tính bằng microgam trên gam (µg/g).

7.3  Hàm lượng polydextrose

Hàm lượng polydextrose trong phần mẫu thử, X, biểu thị bằng phần trăm (%) khối lượng, được tính bằng Công thức (3):

(3)

Trong đó:

P  là nồng độ polydextrose xác định được theo 6.7, tính bằng microgam trên gam (µg/g);

...

...

...

A_2s  là khối lượng của 0,8 ml hỗn hợp đệm enzym đã thêm vào ống ly tâm 1,7 ml chứa dịch lỏng từ mẫu thử đã qua siêu lọc ly tâm (xem 6.3), tính bằng gam (g);

F  là khối lượng phần mẫu thử (xem 6.2), tính bằng gam (g);

W  là khối lượng nước đã thêm vào phần mẫu thử (xem 6.2), tính bằng gam (g);

0,0001  là hệ số chuyển đổi từ microgam trên gam (µg/g) sang phần trăm (%).

8  Báo cáo thử nghiệm

Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ:

a)  mọi thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ mẫu thử;

b)  phương pháp lấy mẫu đã sử dụng, nếu biết;

c)  phương pháp thử đã sử dụng và viện dẫn tiêu chuẩn này;

...

...

...

e)  kết quả thử nghiệm thu được.

Phụ lục A

(Tham khảo)

Kết quả nghiên cứu liên phòng thử nghiệm

Bảng A.1 - Các kết quả nghiên cứu liên phòng thử nghiệm

Mẫu thử

,%

Số lượng phòng thử nghiệm^a(b)

...

...

...

RSD_r, %

s_R

RSD_R, %

HORRAT

Độ thu hồi, %

Kẹo sôcôla sữa

19,87

8

1,10

...

...

...

2,01

10,11

4,0

99,4

Trà đá

1,86

8

0,12

6,37

...

...

...

10,70

2,9

93,0

Bánh quy đường

8,11

7(1)

0,41

5,10

0,86

...

...

...

3,6

81,1

Thạch nho

5,14

7(1)

0,46

9,04

0,72

14,06

...

...

...

102,8

Polydextrose

92,57

8

3,64

3,93

4,15

4,48

2,2

...

...

...

Kẹo mềm

33,14

8

2,55

7,71

3,58

10,81

4,6

87,2

...

...

...

1,84

7(1)

0,14

7,71

0,18

9,88

2,7

92,0

^a  là số lượng phòng thử nghiệm cộng tác được giữ lại sau khi loại trừ ngoại lệ;

...

...

...

s_r  là độ lệch chuẩn lặp lại;

s_R  là độ lệch chuẩn tái lập;

RSD_r  là độ lệch chuẩn tương đối lặp lại;

RSD_R  là độ lệch chuẩn tương đối tái lập.

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 12383:2018 về Thực phẩm - Xác định hàm lượng polydextrose - Phương pháp sắc ký ion