Thời gian của van chuyển:

0,00 min

Cấu hình 1

xem Hình 1

1,50 min

Cấu hình 2

xem Hình 2

13,50 min

Cấu hình 1

...

...

...

CHÚ DẪN:

1  Bơm 1

2  Cột bảo vệ PA1

3  Bơm 2

4  Phần thải

5  Cột bảo vệ MA1 và cột phân tích

6  Detector điện hóa

...

...

...

CHÚ DẪN:

1  Bơm 1

2  Cột bảo vệ PA1

3  Bơm 2

4  Phần thải

5  Cột bảo vệ MA1 và cột phân tích

6  Detector điện hóa

Hình 2 - Cấu hình van chuyển 2

...

...

...

Dải analog: 1 μC

Chương trình detector: Dionex ICS 3000 hoặc ICS 50003)

0,0 s

+0,10 V

0,20 s

+0,10 V

0,40 s

+0,10 V

0,41 s

...

...

...

0,42 s

-2,00 V

0,43 s

+0,60 V

0,44 s

-0,10 V

0,50 s

-0,10 V

Thời gian tích phân: 0,20 s đến 0,40 s.

...

...

...

6.3.3  Khởi động thiết bị

Chuẩn bị các pha động. Nếu cần, thổi khí heli các pha động và/hoặc điều áp các bể pha động. Làm sạch và làm bóng điện cực làm việc bằng vàng. Bật detector và bơm pha động khắp cột ở tốc độ dòng 0,40 ml/min trong ít nhất 30 min để cân bằng hệ thống, nếu cần. Kiểm tra độ ổn định của detector trước khi bắt đầu phân tích. Bơm 20 μl dung dịch chuẩn có nồng độ cao nhất ít nhất 5 lần và ghi lại diện tích hoặc chiều cao pic. Nếu hệ thống đã cân bằng, thì độ lệch chuẩn tương đối (RSD) của diện tích hoặc chiều cao pic của ba lần bơm sau cùng cần ≤ 2,0%.

6.3.4  Phân tích chất chuẩn và mẫu

Khi hệ thống đã cân bằng, bơm một chất chuẩn của mỗi nồng độ (4.2.4 và 4.2.5). Sau khi bơm xong dãy chất chuẩn, có thể bơm các mẫu kiểm soát và mẫu thử trước khi bơm dãy chất chuẩn khác.

6.3.5  Tắt hệ thống

Sau khi phân tích xong tất cả các mẫu chuẩn và mẫu thử, bơm 20 μl nước để làm sạch kim và ống của bộ lấy mẫu tự động. Bảo quản cột phân tích trong pha động [natri hydroxit 0,12% (30 mmol/l)]. Tắt cuvet điện hóa. Dùng nước thổi sạch đầu bơm để loại hết natri hydroxit.

7  Tính kết quả

7.1  Yêu cầu chung

Trước khi tính nồng độ myo-inositol trong mẫu, so sánh các pic myo-inositol của chất chuẩn với các pic myo-inositol của mẫu thử và khẳng định rằng không có các hợp chất gây nhiễu và các diện tích hoặc chiều cao pic myo-inositol của mẫu nằm trong dải diện tích hoặc chiều cao pic myo-inositol của chất chuẩn. Không thể tính được nồng độ myo-inositol nếu có mặt các chất gây nhiễu hoặc nếu tách kém. Thời gian lưu của myo-inositol cần nằm trong khoảng từ 11 min đến 13 min phụ thuộc vào cột phân tích cụ thể.

...

...

...

Tính nồng độ các chất chuẩn hiệu chuẩn theo Công thức (1):

(1)

Trong đó:

C_w là nồng độ của dung dịch chất chuẩn hiệu chuẩn, tính bằng miligam trên lít (mg/l);

m là khối lượng chất chuẩn myo-inositol đã cân, tính bằng miligam (mg);

0,05 là thể tích pha loãng của chất chuẩn gốc, tính bằng lít () (xem 4.2.2);

1/10 là độ pha loãng của chất chuẩn trung gian (10 ml đến 100 ml);

A₁ là lượng dung dịch chuẩn trung gian sử dụng được, tính bằng mililit (ml) (xem 4.2.4.1);

...

...

...

A₂ là lượng dung dịch chuẩn trung gian sử dụng được, tính bằng mililit (ml) (xem 4.2.4.2), nếu áp dụng;

V₂ là thể tích pha loãng của chất chuẩn hiệu chuẩn nồng độ thấp, tính bằng mililit (ml) (xem 4.2.4.2), nếu áp dụng;

p là độ tinh khiết của chất chuẩn đầu ghi trên nhãn hoặc được xác định bằng thực nghiệm, tính bằng miligam trên miiigam (mg/mg).

7.3  Dựng đường chuẩn

Đối với mỗi nồng độ chất chuẩn hiệu chuẩn, tính trung bình diện tích hoặc chiều cao pic từ ít nhất hai dãy chất chuẩn liên tiếp. Dựng đường chuẩn bằng cách dựng tính tuyến tính bình phương nhỏ nhất (hồi quy) các nồng độ so với diện tích hoặc chiều cao trung bình của pic.

7.4  Tính myo-inositol tự do hoặc myo-inositol tự do và liên kết có trong mẫu

7.4.1  Tính myo-inositol tự do

Tính nồng độ myo-inositol tự do trong mẫu đã chuẩn bị được ngoại suy từ đường chuẩn trong 7.3. Từ nồng độ của mẫu pha loãng đã chuẩn bị, có thể tính nồng độ myo-inositol tự do có trong mẫu theo Công thức (2):

...

...

...

Trong đó

C_f là nồng độ myo-inositol tự do trong mẫu sản phẩm, tính bằng miligam trên kilogam (mg/kg);

C_d là nồng độ myo-inositol trong mẫu đã chuẩn bị, tính bằng miligam trên lít (mg/l);

100 là thể tích pha loãng, tính bằng mililit (ml);

m_s là khối lượng mẫu thử, tính bằng gam (g).

7.4.2  Tính myo-inositol liên kết

Tính nồng độ myo-inositol liên kết trong mẫu đã chuẩn bị được ngoại suy từ đường chuẩn trong 7.3. Từ nồng độ của mẫu pha loãng đã chuẩn bị, có thể tính nồng độ myo-inositol liên kết có trong mẫu theo Công thức (3):

(3)

...

...

...

C_b là nồng độ myo-inositol liên kết trong mẫu sản phẩm, tính bằng miligam trên kilogam (mg/kg);

C_d là nồng độ myo-inositol trong mẫu đã chuẩn bị, tính bằng miligam trên lít mg/l;

50 là thể tích pha loãng, tính bằng mililit (ml).

m_s là khối lượng mẫu thử, tính bằng gam.

7.4.3  Tính tổng myo-inositol tự do và liên kết

Tính nồng độ của myo-inositol tự do và liên kết trong mẫu đã chuẩn bị theo Công thức (4):

C_T = C_f + C_b

(4)

Trong đó: C_T là nồng độ của myo-inositol tự do và liên kết trong mẫu sản phẩm tính bằng miligam trên kilogam (mg/kg).

...

...

...

Phụ lục A

(Tham khảo)

Ví dụ về sắc ký đồ

CHÚ DẪN:

X là thời gian, tính bằng phút;

Y là đơn vị tùy chọn

1 myo-inositol

Hình A.1 - Ví dụ về sắc ký đồ của chất chuẩn điển hình

...

...

...

CHÚ DẪN:

X là thời gian, tính bằng phút;

Y là đơn vị tùy chọn

1 myo-inositol

Hình A.2 - Ví dụ về sắc ký đồ của chất chuẩn SRM 1849a

Phụ lục B

(Tham khảo)

Dữ liệu về độ chụm

...

...

...

Bảng B.1 - Myo-inositol tự do

Dạng mẫu

Số phòng thử nghiệm còn lại sau khi trừ ngoại lệ

Số phòng thử nghiệm ngoại lệ

Tổng số xác định lặp lại được chấp nhận

Giá trị trung bình (mg/100 g RTF)

S_r

S_R

C_v,r

...

...

...

Trị số HorRat^a

NIST SRM 1849a

10

0

22

412^b

11,3

11,4

2,75

...

...

...

0,43

Bột đậu nành công thức dành cho trẻ sơ sinh

10

0

22

4,22

0,127

0,305

3,03

...

...

...

0,80

Sữa bột công thức dành cho trẻ sơ sinh

10

0

20

4,26

0,168

0,232

3,95

...

...

...

0,60

Sữa công thức RTF dành cho trẻ sơ sinh

9

0

20

7,17

0,095

0,207

1,33

...

...

...

0,34

Thức ăn công thức dành cho trẻ sơ sinh dạng bột từ sữa đã thủy phân một phần

10

0

22

3,65

0,035

0,412

0,97

...

...

...

1,22

Thức ăn công thức dành cho trẻ sơ sinh dạng bột từ đậu tương đã thủy phân từng phần

10

0

22

3,11

0,089 9

0,389

2,92

...

...

...

1,32

Thức ăn công thức dạng bột dành cho trẻ nhỏ

10

0

22

5,10

0,185

0,246

3,61

...

...

...

0,54

Thức ăn dạng bột dành cho trẻ sơ sinh

10

0

22

5,10

0,227

0,318

4,45

...

...

...

0,71

Sữa công thức RTF dành cho trẻ sơ sinh, không bổ sung vi chất

9

0

20

3,17

0,058 2

0,091 0

1,84

...

...

...

0,30

^a Trị số HorRat, theo Tài liệu tham khảo [7]

^b Kết quả tính bằng mg/kg bột.

RTF: Dùng ngay.

Bảng B.2- Myo-inositol liên kết như phosphatidylinositol

Dạng mẫu

Số phòng thử nghiệm còn lại sau khi trừ ngoại lệ

Số phòng thử nghiệm ngoại lệ

...

...

...

Giá trị trung bình (mg/100 g RTF)

S_r

S_R

C_v,r

C_v,R

Trị số HorRat^a

NIST SRM 1849a

9

0

...

...

...

9,51^b

1,82

2,62

18,7

26,8

2,36

Bột đậu nành công thức dành cho trẻ sơ sinh

9

0

...

...

...

2,10

0,150

0,501

6,94

23,2

2,30

Sữa bột công thức dành cho trẻ sơ sinh

9

0

...

...

...

0,667

0,026 1

0,172

3,92

25,9

2,15

Sữa công thức RTF dành cho trẻ sơ sinh

8

0

...

...

...

0,348

0,030 1

0,090 9

8,36

25,2

1,91

Thức ăn công thức dành cho trẻ sơ sinh dạng bột từ sữa đã thủy phân một phần

9

0

...

...

...

0,214

0,010 3

0,057 6

4,72

26,4

1,86

Thức ăn công thức dành cho trẻ sơ sinh dạng bột từ đậu tương đã thủy phân từng phần

9

0

...

...

...

1,64

0,093 6

0,358

5,53

21,1

2,02

Thức ăn công thức dạng bột dành cho trẻ nhỏ

9

0

...

...

...

0,328

0,023 4

0,087 8

6,89

25,8

1,94

Thức ăn dạng bột dành cho trẻ sơ sinh

9

0

...

...

...

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

0,00

Sữa công thức RTF dành cho trẻ sơ sinh, không bổ sung vi chất

8

0

...

...

...

0,305

0,024 4

0,085 0

7,71

26,9

2,00

^a Trị số HorRat, theo Tài liệu tham khảo [7]

^b Kết quả tính bằng mg/kg bột.

RTF: Dùng ngay.

...

...

...

Bảng B.3- Myo-inositol tự do cộng với myo-inositol liên kết như phosphatidylinositol

Dạng mẫu

Số phòng thử nghiệm còn lại sau khi trừ ngoại lệ

Số phòng thử nghiệm ngoại lệ

Tổng số xác định lặp lại được chấp nhận

Giá trị trung bình (mg/100 g RTF)

S_r

S_R

C_v,r

...

...

...

Trị số HorRat^a

NIST SRM 1849a

9

0

20

422^b

11,9

11,9

2,83

...

...

...

0,44

Bột đậu nành công thức dành cho trẻ sơ sinh

9

0

20

6,27

0,147

0,446

2,32

...

...

...

0,82

Sữa bột công thức dành cho trẻ sơ sinh

9

0

18

4,92

0,184

0,314

3,74

...

...

...

0,72

Sữa công thức RTF dành cho trẻ sơ sinh

8

0

18

7,50

0,106

0,218

1,41

...

...

...

0,35

Thức ăn công thức dành cho trẻ sơ sinh dạng bột từ sữa đã thủy phân một phần

9

0

20

3,84

0,035

0,426

0,91

...

...

...

1,21

Thức ăn công thức dành cho trẻ sơ sinh dạng bột từ đậu tương đã thủy phân từng phần

9

0

20

4,71

0,152

0,357

3,22

...

...

...

0,84

Thức ăn công thức dạng bột dành cho trẻ nhỏ

9

0

20

5,42

0,203

0,307

3,73

...

...

...

0,64

Thức ăn dạng bột dành cho trẻ sơ sinh

9

0

20

5,08

0,237

0,324

4,67

...

...

...

0.72

Sữa công thức RTF dành cho trẻ sơ sinh, không bổ sung vi chất

8

0

18

3,46

0,065 9

0,128

1,90

...

...

...

0,39

^a Trị số HorRat, theo Tài liệu tham khảo [7]

^b Kết quả tính bằng mg/kg bột.

RTF: Dùng ngay.

Thư mục tài liệu tham khảo

[1]  J. AOAC Int. 2012, 95 p. 937

[2]  J. AOAC Int. 2012, 95 p. 295

[3]  2011.18, Determination of Myo-lnositol in Infant, Pediatric, and Adult Formulas by IC-PAD and Column Switching: Collaborative Study

...

...

...

[5]  AOAC INTERNATIONAL AOAC Official Methods Program, Associate Referee's Manual on Development, study, Review, and Approval Process. Part IV AOAC Guidelines for Collaborative Studies, 1995, pp. 23-51

[6]  AOAC SMPR 2011.07, standard Method Performance Requirements for Myo-inositol in infant formula and Adult/Pediatric Nutritional formula

[7]  THOMPSON M. Recent Trends in Inter-Laboratory Precision at ppb and sub-ppb Concentrations in Relation to Fitness for Purpose Criteria in Proficiency Testing. Analyst (Lond.). 2000,125 pp. 385-386

Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 11912:2017 (ISO 20637:2015) về Thức ăn công thức dành cho trẻ sơ sinh và thực phẩm dinh dưỡng cho người lớn - Xác định myo-inositol bằng sắc ký lỏng và đo ampe xung