Quy chuẩn kỹ thuật Quốc gia QCVN 4-12:2010/BYT về phụ gia thực phẩm - chất bảo quản do Bộ trưởng Bộ Y tế ban hành

Tải văn bản

Thuộc tính
Nội dung
Tiếng anh
Lược đồ

1.1.	Phụ lục 1:	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với acid sorbic
1.2.	Phụ lục 2:	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với kali sorbat
1.3.	Phụ lục 3:	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với calci sorbat
1.4.	Phụ lục 4:	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với acid benzoic
1.5.	Phụ lục 5:	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với natri benzoat
1.6.	Phụ lục 6:	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với kali benzoat
1.7.	Phụ lục 7:	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với calci benzoat
1.8.	Phụ lục 8:	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với ethyl p-hydroxybenzoat
1.9	Phụ lục 9 :	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với methyl p-hydroxybenzoat
1.10	Phụ lục 10 :	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với lưu huỳnh dioxyd
1.11	Phụ lục 11 :	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với natri sulfit
1.12	Phụ lục 12 :	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với natri hydrogen sulfit
1.13	Phụ lục 13 :	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với natri metabisulfit
1.14	Phụ lục 14:	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với kali metabisulfit
1.15	Phụ lục 15:	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với kali sulfit
1.16	Phụ lục 16:	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với nisin
1.17	Phụ lục 17:	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với hexamethylen tetramin
1.18	Phụ lục 18:	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với dimethyl dicarbonat
1.19	Phụ lục 19:	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với acid propionic
1.20	Phụ lục 20:	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với natri propionat
1.21	Phụ lục 21:	Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với natri thiosulfat

2. Yêu cầu kỹ thuật và phương pháp thử đối với natri nitrat và kali nitrat sử dụng làm chất bảo quản được quy định tại QCVN 4-5 :2010/BYT ban hành theo Thông tư số 22/2010/TT-BYT ngày 20/5/2010 của Bộ trưởng Bộ Y tế.

3. Các yêu cầu kỹ thuật quy định trong Quy chuẩn này được thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4, ngoại trừ một số phép thử riêng được mô tả trong các phụ lục. Các phương pháp thử được hướng dẫn trong Quy chuẩn này không bắt buộc phải áp dụng, có thể sử dụng các phương pháp thử khác tương đương.

4. Lấy mẫu theo hướng dẫn tại Thông tư 16/2009/TT-BKHCN ngày 02 tháng 6 năm 2009 của Bộ Khoa học và Công nghệ về hướng dẫn kiểm tra nhà nước về chất lượng hàng hóa lưu thông trên thị trường và các quy định khác của pháp luật có liên quan.

III. YÊU CẦU QUẢN LÝ

1. Công bố hợp quy

1.1. Các chất bảo quản phải được công bố phù hợp với các quy định tại Quy chuẩn này.

1.2. Phương thức, trình tự, thủ tục công bố hợp quy được thực hiện theo Quy định về chứng nhận hợp chuẩn, chứng nhận hợp quy và công bố hợp chuẩn, công bố hợp quy ban hành kèm theo Quyết định số 24/2007/QĐ-BKHCN ngày 28 tháng 9 năm 2007 của Bộ trưởng Bộ Khoa học và Công nghệ và các quy định của pháp luật.

2. Kiểm tra đối với chất bảo quản

Việc kiểm tra chất lượng, vệ sinh an toàn đối với các chất bảo quản phải thực hiện theo các quy định của pháp luật.

...

Bạn phải đăng nhập hoặc đăng ký Thành Viên TVPL Pro để sử dụng được đầy đủ các tiện ích gia tăng liên quan đến nội dung TCVN.

Mọi chi tiết xin liên hệ: ĐT: (028) 3930 3279 DĐ: 0906 22 99 66

1. Tổ chức, cá nhân phải công bố hợp quy phù hợp với các quy định kỹ thuật tại Quy chuẩn này, đăng ký bản công bố hợp quy tại Cục An toàn vệ sinh thực phẩm và bảo đảm chất lượng, vệ sinh an toàn theo đúng nội dung đã công bố.

2. Tổ chức, cá nhân chỉ được nhập khẩu, xuất khẩu, sản xuất, buôn bán và sử dụng các chất bảo quản sau khi hoàn tất đăng ký bản công bố hợp quy và bảo đảm chất lượng, vệ sinh an toàn, ghi nhãn phù hợp với các quy định của pháp luật.

V. TỔ CHỨC THỰC HIỆN

1. Giao Cục An toàn vệ sinh thực phẩm chủ trì, phối hợp với các cơ quan chức năng có liên quan hướng dẫn triển khai và tổ chức việc thực hiện Quy chuẩn này.

2. Căn cứ vào yêu cầu quản lý, Cục An toàn vệ sinh thực phẩm có trách nhiệm kiến nghị Bộ Y tế sửa đổi, bổ sung Quy chuẩn này.

3. Trường hợp hướng dẫn của quốc tế về phương pháp thử và các quy định của pháp luật viện dẫn trong Quy chuẩn này được sửa đổi, bổ sung hoặc thay thế thì áp dụng theo văn bản mới.

PHỤ LỤC 1

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI ACID SORBIC

1. Tên khác, chỉ số

...

INS 200

ADI = 0 – 25 mg/kg thể trọng

2. Định nghĩa

Tên hóa học

Acid sorbic; acid 2,4-hexadienoic; acid 2-propenylacrylic

Mã số C.A.S.

110-44-1

Công thức hóa học

...

Công thức cấu tạo

Khối lượng phân tử

112,12

3. Cảm quan

Dạng tinh thể hình kim không màu hoặc bột trơn chảy màu trắng, có mùi nhẹ đặc trưng.

4. Chức năng

Chất bảo quản chống vi sinh vật, chất chống nấm

5. Yêu cầu kỹ thuật

...

Độ tan

Tan trong ethanol, ít tan trong nước.

Khoảng nhiệt độ nóng chảy

132-135oC (Máy đo điểm chảy cần được gia nhiệt đến 125o trước khi cho mẫu vào đo).

Quang phổ

Cực đại hấp thụ của dung dịch 1/400.000 trong isopropanol là 254±2 nm.

Liên kết đôi

Phải có phản ứng đặc trưng cho liên kết đôi.

...

Hàm lượng nước

Không được quá 0,5%.

Tro sunfat

Không được quá 0,2%.

Các Aldehyd

Không được quá 0,1% (tính theo formaldehyd).

Chì

Không được quá 2,0 mg/kg.

...

Không được thấp hơn 99% tính theo chế phẩm khan.

6. Phương pháp thử

6.1. Định tính

Liên kết đôi

Lắc khoảng 0,02 g mẫu thử với 1ml dung dịch brom (TS) . Dung dịch brom sẽ mất màu.

6.2. Độ tinh khiết

Hàm lượng nước

...

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4.

Tro sunfat

- Sử dụng 2 g mẫu thử.

- Thử theo phương pháp I, JECFA monograph 1 - Vol.4.

Các Aldehyd

Thêm 0,5 ml dung dịch thuốc thử Schiff (TS) vào 1 ml dung dịch bão hòa mẫu thử trong nước rồi để yên 10-15 phút. So sánh màu của ống thử với màu tạo thành từ 1 ml dung dịch formaldehyd (chứa 2 µg) với cùng lượng thuốc thử Schiff và cùng điều kiện như mẫu thử. Màu của dung dịch thử không được đậm hơn màu của dung dịch đối chứng.

Chì

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4.

- Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol.4 phần các phương pháp phân tích công cụ.

...

Cân 0,25 g (chính xác đến mg) mẫu thử, hoà tan trong 50 ml methanol khan đã được trung hoà bằng dung dịch natri hydroxyd 0,1 N. Thêm vài giọt dung dịch phenolphthalein (TS), chuẩn độ tiếp bằng dung dịch natri hydroxyd 0,1 N cho đến khi xuất hiện màu hồng bền trong vòng 30 giây.

Mỗi ml dung dịch natri hydroxyd 0,1 N tương đương với 11,21 mg C6H8O2.

PHỤ LỤC 2

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI KALI SORBAT

1. Tên khác, chỉ số

Potassium sorbate

...

ADI = 0 – 25 mg/kg thể trọng

2. Định nghĩa

Tên hóa học

Kali sorbat; Muối kali của acid trans, trans-2,4-hexadienoic

Mã số C.A.S.

24634-16-5

Công thức hóa học

C6H7KO2

...

Khối lượng phân tử

150,22

3. Cảm quan

Dạng tinh thể, bột tinh thể hoặc hạt nhỏ có màu trắng hoặc trắng hơi vàng.

4. Chức năng

Chất bảo quản

5. Yêu cầu kỹ thuật

5.1. Định tính

...

Độ tan

Tan tốt trong nước, tan trong ethanol.

Kali

Phải có phản ứng đặc trưng của kali.

Khoảng nhiệt độ nóng chảy của acid sorbic lấy ra từ mẫu thử

132-135oC.

Liên kết không no

Phải có phản ứng đặc trưng của liên kết không no

5.2. Độ tinh khiết

...

Giảm khối lượng khi sấy khô

Không được quá 1,0 %.

Tính acid hoặc tính kiềm

Không được quá 1,0 % (tính theo acid sorbic hoặc kali carbonat).

Các Aldehyd

Không được quá 0,1% (tính theo formaldehyd).

Chì

Không được quá 2,0 mg/kg.

5.3. Hàm lượng C6H7KO2

...

6. Phương pháp thử

6.1. Định tính

Kali

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

Khoảng nhiệt độ nóng chảy của acid sorbic lấy ra từ mẫu thử

Acid hóa dung dịch mẫu thử bằng dung dịch acid hydrocloric loãng (TS). Lọc và thu phần acid sorbic kết tủa tạo thành trên giấy lọc, rửa tủa bằng nước cho đến khi không còn clorid và làm khô trên acid sulfuric trong chân không.

Thử liên kết không no

Thêm vài giọt dung dịch thuốc thử brom (TS) vào 2 ml dung dịch mẫu thử nồng độ 1/10. Nước brom sẽ mất màu.

...

Giảm khối lượng khi sấy khô

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4. (sấy ở 105oC trong 3 giờ).

Tính acid hoặc tính kiềm

Hoà tan 1,1 g mẫu thử trong 20 ml nước và thêm 3 giọt dung dịch phenolphthalein (TS). Nếu dung dịch thử không màu, chuẩn độ bằng dung dịch natri hydroxyd 0,1 N đến khi xuất hiện màu hồng bền trong 15 giây. Thể tích dung dịch natri hydroxyd 0,1 N sử dụng không được quá 1,1 ml.

Nếu dung dịch mẫu thử có màu hồng, chuẩn độ bằng dung dịch acid hydrochloric 0,1 N đến khi mất màu. Thể tích dung dịch acid hydrochloric 0,1 N sử dụng không quá 0,8 ml.

Các Aldehyd

Pha dung dịch mẫu thử 0,3 %, chỉnh pH đến 4 bằng HCl 1 N và lọc. Lấy 5 ml dịch lọc, thêm 2,5 ml thuốc thử Schiff (TS) và để yên 10-15 phút. So sánh màu của dịch thử với màu thu được khi lấy 5 ml dung dịch chứng có chứa 15 µg formaldehyd thay cho mẫu thử. Màu của dịch thử không được đậm hơn màu của dung dịch chứng.

Chì

...

6.3. Định lượng

Cân 0,25 g mẫu thử (chính xác đến 0,1 mg), đã được sấy ở 105oC trong 3 giờ. Hoà tan vào hỗn hợp gồm 36 ml acid acetic băng và 4 ml anhydrid acetic trong bình dung tích 250 ml có nút thủy tinh, làm ấm dung dịch để tan hoàn toàn. Làm nguội đến nhiệt độ phòng, thêm 2 giọt chỉ thị là dung dịch tím tinh thể (TS) và chuẩn độ bằng dung dịch acid percloric 0,1 N trong acid acetic băng, đến khi dung dịch có màu lục lam bền ít nhất 30 giây. Tiến hành làm mẫu trắng song song và hiệu chỉnh kết quả chuẩn độ nếu cần.

Mỗi ml dung dịch acid percloric 0,1 N trong acid acetic băng tương đương với 15,02 mg C6H7KO2.

PHỤ LỤC 3

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI CALCI SORBAT

...

Calcium sorbate

INS 203

ADI = 0 - 25 mg/kg thể trọng

2. Định nghĩa

Tên hóa học

Calci sorbat ; Muối calci của acid trans, trans-2,4-hexadienoic

Mã số C.A.S.

7492-55-9

...

C12H14CaO4

Công thức cấu tạo

Khối lượng phân tử

262,32

3. Cảm quan

Bột tinh thể trắng, mịn, không thay đổi màu khi đun nóng tại 105oC trong 90 phút.

4. Chức năng

Chất bảo quản

...

5.1. Định tính

Độ tan

Tan trong nước, thực tế không tan trong ethanol

Calci

Phải có phản ứng đặc trưng của calci.

Khoảng nhiệt độ nóng chảy của acid sorbic lấy ra từ mẫu thử

132-135oC.

Liên kết không no

...

5.2. Độ tinh khiết

Giảm khối lượng khi sấy khô

Không được quá 3,0 %.

Florid

Không được quá 10,0 mg/kg.

Aldehyd

Không được quá 0,1% (tính theo formaldehyd).

Chì

...

5.3. Hàm lượng C12H14CaO4

Không được thấp hơn 98,0% và không được quá 102,0% tính theo chế phẩm khô.

6. Phương pháp thử

6.1. Định tính

Calci

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

Khoảng nhiệt độ nóng chảy của acid sorbic lấy ra từ mẫu thử

Acid hóa dung dịch mẫu thử bằng dung dịch acid hydrocloric loãng (TS). Lọc và thu phần acid sorbic kết tủa tạo thành trên giấy lọc, rửa tủa với nước tinh khiết đến khi không còn clorid và làm khô trên acid sulfuric trong chân không.

...

Thêm vài giọt dung dịch thuốc thử brom (TS) và 2 ml dung dịch mẫu thử nồng độ 1/10. Dung dịch brom sẽ mất màu.

6.2. Độ tinh khiết

Giảm khối lượng khi sấy khô

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4 (trong chân không, trên acid sulfuric trong 4 giờ).

Florid

Thử theo phương pháp I hoặc III, JECFA monograph 1 - Vol. 4 (cân 5 g mẫu thử, chính xác đến mg).

Aldehyd

Pha dung dịch mẫu thử 0,3 %, chỉnh pH đến 4 bằng HCl 1 N và lọc. Lấy 5 ml dịch lọc, thêm 2,5 ml thuốc thử Schiff (TS) và để yên 10-15 phút. So màu của mẫu thử với màu thu được với 5 ml dung dịch chứng có chứa 15 µg formaldehyd thay cho mẫu thử. Màu của dung dịch thử không được đậm hơn màu của dung dịch chứng.

...

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol.4.

6.3. Định lượng

Cân 0,25 g mẫu thử đã được làm khô, chính xác đến mg. Hoà tan vào 35 ml acid acetic băng và 4 ml anhydrid acetic trong bình 250 ml có nút thủy tinh, làm ấm dung dịch. Để nguội đến nhiệt độ phòng, thêm 2 giọt chỉ thị tím tinh thể (TS) và chuẩn độ bằng dung dịch acid percloric 0,1 N trong acid acetic băng, khi đến điểm kết thúc dung dịch có màu lục lam bền ít nhất 30 giây. Tiến hành làm mẫu trắng và hiệu chỉnh kết quả chuẩn độ nếu cần.

Mỗi ml dung dịch acid percloric 0,1 N trong acid acetic băng tương đương với 13,12 mg C12H14CaO4

PHỤ LỤC 4

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI ACID BENZOIC

...

Benzoic acid

INS 210

ADI = 0 – 5 mg/kg thể trọng

2. Định nghĩa

Tên hóa học

Acid benzoic, acid benzencarboxylic,

acid phenylcarboxylic

Mã số C.A.S.

...

Công thức hóa học

C7H6O2

Công thức cấu tạo

Khối lượng phân tử

122,12

3. Cảm quan

Tinh thể rắn màu trắng, thường có dạng vảy hoặc hình kim, có mùi đặc trưng rất nhẹ.

4. Chức năng

...

5. Yêu cầu kỹ thuật

5.1. Định tính

Độ tan

Ít tan trong nước, dễ tan trong ethanol

Khoảng nóng chảy

121oC -123oC

Benzoat

Phải có phản ứng đặc trưng của benzoat.

...

Khoảng 4,0 (dung dịch trong nước)

5.2. Độ tinh khiết

Giảm khối lượng khi làm khô

Không được quá 0,5%.

Thử thăng hoa

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử).

Tro sunfat

Không vượt quá 0,05%

...

Không được quá 2,0 mg/kg.

Các chất dễ bị than hóa

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử).

Các hợp chất clor hữu cơ

Không được quá 0,07% (tính theo Cl2).

Các chất dễ bị oxy hóa

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử).

5.3. Hàm lượng C7H6O2

Không được thấp hơn 99,5% tính theo chế phẩm khô.

...

6.1. Định tính

Benzoat

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Sử dụng 0,1 g mẫu với 0,1 g calci carbonat và 5ml nước

6.2. Độ tinh khiết

Giảm khối lượng khi làm khô

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

Thử thăng hoa

Cho một lượng nhỏ mẫu thử vào trong một ống nghiệm khô. Bọc ống nghiệm bằng một giấy lọc ẩm cách 4 cm tính từ đáy ống. Đốt nóng ống nghiệm trên ngọn lửa. Acid benzoic thăng hoa và các tinh thể hình thành bám trên thành ống nghiệm có nhiệt độ thấp hơn và không còn cặn ở đáy ống nghiệm.

Chì

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Xác định bằng kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1 - Vol. 4 phần các phương pháp phân tích công cụ.

Các chất dễ bị than hóa

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Cân 0,5g (chính xác đến mg) mẫu thử, hòa tan trong 5 ml acid sulfuric (TS). Màu tạo thành trong dung dịch không được đậm hơn màu hồng nhạt của “dung dịch đối chứng Q”

Các chất clor hữu cơ

...

Các chất dễ bị oxy hóa

Thêm 1,5 ml acid sulfuric vào 100 ml nước cất, đun sôi hỗn hợp, nhỏ từng giọt dung dịch kali permanganat 0,1N đến khi dung dịch có màu hồng bền trong 30 giây. Cân 1 g mẫu, chính xác đến mg, cho vào dung dịch đã chuẩn bị, còn nóng, và chuẩn độ bằng dung dịch kali permanganat 0,1 N tới khi dung dịch có màu hồng bền trong 15 giây. Thể tích dung dịch kali permanganat sử dụng để chuẩn độ không được quá 0,5 ml.

6.3. Định lượng

Cân 2,5 g (chính xác đến mg) mẫu thử đã được sấy khô. Hoà tan trong 15 ml ethanol ấm, trước đó đã được trung hoà và với chỉ thị là dung dịch đỏ phenol (TS). Thêm 20 ml nước cất và chuẩn độ bằng dung dịch natri hydroxyd 0,5 N với chỉ thị là phenolphthalein (TS).

Mỗi ml dung dịch natri hydroxyd 0,5 N tương đương với 61,06 mg C7H6O2.

PHỤ LỤC 5

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI NATRI BENZOAT

...

Sodium benzoate;

INS 211

ADI = 0 - 5 mg/kg thể trọng

2. Định nghĩa

Tên hóa học

Muối natri của acid benzencarboxylic, muối natri của acid phenylcarboxylic

Mã số C.A.S.

532-32-1

...

C7H5NaO2

Công thức cấu tạo

Khối lượng phân tử

144,11

3. Cảm quan

Bột tinh thể, dạng mảnh hay hạt, màu trắng, hầu như không mùi

4. Chức năng

Chất bảo quản chống vi sinh vật

...

5.1. Định tính

Độ tan

Dễ tan trong nước, ít tan trong ethanol.

Natri

Phải có phản ứng đặc trưng của natri.

Benzoat

Phải có phản ứng đặc trưng của benzoat.

5.2. Độ tinh khiết

...

Giảm khối lượng khi sấy khô

Không được quá 1,5%.

Tính acid hoặc tính kiềm

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử).

Các chất dễ bị than hóa

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử).

Các hợp chất clor hữu cơ

Không được quá 0,07% (tính theo Cl2).

Các chất dễ bị oxy hóa

...

Chì

Không được quá 2,0 mg/kg.

5.3. Hàm lượng C7H5NaO2

Không được thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm khan.

6. Phương pháp thử

6.1. Định tính

Natri

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Sử dụng dung dịch mẫu thử 10%)

6.2. Độ tinh khiết

Giảm khối lượng khi sấy khô

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Sấy tại 105oC trong 4 giờ.

Tính acid hoặc tính kiềm

Cân 2 g mẫu thử, chính xác đến mg, hòa tan trong 20 ml nước mới đun sôi để nguội. Trung hòa dung dịch này bằng dung dịch natri hydroxyd 0,1N hoặc acid hydrocloric 0,1 N với chỉ thị là dung dịch phenolphtalein (TS). Thể tích dung dịch natri hydroxyd 0,1 N hoặc acid hydrocloric 0,1 N sử dụng không được quá 0,5 ml.

...

Cân 0,5 g mẫu thử, chính xác đến mg, hòa tan trong 5 ml acid sulfuric (TS). Màu tạo thành trong dung dịch không được đậm hơn màu hồng nhạt của “dung dịch đối chứng Q” (Thử theo hướng dẫn trong JECFA monograph 1 - Vol. 4).

Các chất clor hữu cơ

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Thử với 0,25 g mẫu thử, sử dụng 0,5 ml dung dịch acid hydrocloric 0,01 N làm đối chứng

Các chất dễ bị oxy hóa

Thêm 1,5 ml acid sulfuric vào 100 ml nước cất, đun sôi hỗn hợp, nhỏ vào từng giọt dung dịch kali permanganat 0,1 N đến khi dung dịch có màu hồng bền trong 30 giây. Cân 1g mẫu, chính xác đến mg, hòa vào dung dịch đã chuẩn bị, còn nóng, và chuẩn độ bằng dung dịch kali permanganat 0,1 N tới khi dung dịch có màu hồng bền trong 15 giây. Thể tích dung dịch kali permanganat 0,1 N sử dụng để chuẩn độ không được quá 0,5 ml.

Chì

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

Cân 3 g mẫu thử đã được sấy tại 105oC trong 4 giờ, chính xác đến mg, cho vào bình nón 250 ml. Thêm 50 ml nước cất, hòa tan. Trung hòa dung dịch bằng dung dịch acid hydrocloric 0,1 N với chỉ thị là dung dịch phenolphtalein (TS) nếu cần. Thêm 50 ml ether và vài giọt dung dịch xanh bromophenol (TS), chuẩn độ bằng dung dịch acid hydrocloric 0,5 N, lắc bình đều khi chuẩn độ, đến khi chỉ thị bắt đầu đổi màu. Chuyển phần nước phía dưới sang bình khác. Rửa lớp ether còn lại với 10 ml nước cất, gộp phần nước rửa vào vào phần nước đã tách ra và thêm 20 ml ether vào nước rửa. Chuẩn độ tiếp bằng dung dịch acid hydrocloric 0,5 N, lắc đều.

Mỗi ml dung dịch acid hydrocloric 0,5 N tương đương với 72,05 mg C7H5NaO2.

PHỤ LỤC 6

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI KALI BENZOAT

1. Tên khác, chỉ số

Potasium benzoate;

INS 212

...

2. Định nghĩa

Tên hóa học

muối kali của acid benzencarboxylic, muối kali của acid phenylcarboxylic

Mã số C.A.S.

582-25-2 (dạng khan)

Công thức hóa học

C7H5KO2.3H2O

Công thức cấu tạo

...

Khối lượng phân tử

160,22 (dạng khan C7H5KO2)

214,27 (dạng trihydrat C7H5KO2.3H2O)

3. Cảm quan

Bột tinh thể màu trắng

4. Chức năng

Chất bảo quản chống vi sinh vật

5. Yêu cầu kỹ thuật

5.1. Định tính

...

Độ tan

Dễ tan trong nước, tan trong ethanol.

Kali

Phải có phản ứng đặc trưng của kali.

Benzoat

Phải có phản ứng đặc trưng của benzoat.

5.2. Độ tinh khiết

Giảm khối lượng khi sấy khô

...

Tính acid hoặc tính kiềm

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử).

Các chất dễ bị than hóa

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử).

Các hợp chất clor hữu cơ

Không được quá 0,07% (tính theo Cl2).

Các chất dễ bị oxy hóa

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử).

Chì

...

5.3. Hàm lượng C7H5KO2

Không được thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm khan.

6. Phương pháp thử

6.1. Định tính

Kali

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Sử dụng dung dịch mẫu thử 10%.

Benzoat

...

- Sử dụng dung dịch mẫu thử 10%.

6.2. Độ tinh khiết

Giảm khối lượng khi sấy khô

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Sấy tại 105oC trong 4 giờ.

Tính acid hoặc tính kiềm

Cân 2 g mẫu thử, chính xác đến mg, hòa tan trong 20 ml nước mới đun sôi để nguội. Trung hòa dung dịch này bằng dung dịch natri hydroxyd 0,1 N hoặc acid hydrocloric 0,1 N với chỉ thị là dung dịch phenolphtalein (TS). Thể tích dung dịch natri hydroxyd 0,1 N hoặc acid hydrocloric 0,1 sử dụng không được quá 0,5 ml.

Các chất dễ bị than hóa

...

- Cân 0,5 g mẫu thử, chính xác đến mg, hòa tan trong 5 ml acid sulfuric (TS). Màu tạo thành trong dung dịch không được đậm hơn màu hồng nhạt của “dung dịch đối chứng Q”.

Các chất clor hữu cơ

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Thử với 0,25 g mẫu thử, sử dụng 0,5 ml dung dịch acid hydrocloric 0,01 N làm đối chứng

Các chất dễ bị oxy hóa

Thêm 1,5 ml acid sulfuric vào 100 ml nước cất, đun sôi hỗn hợp, nhỏ vào từng giọt dung dịch kali permanganat 0,1 N đến khi dung dịch có màu hồng bền trong 30 giây. Cân 1g mẫu, chính xác đến mg, hòa tan vào dung dịch đã chuẩn bị, còn nóng, và chuẩn độ bằng dung dịch kali permanganat 0,1 N tới khi dung dịch có màu hồng bền trong 15 giây. Thể tích dung dịch kali permanganat 0,1 N sử dụng để chuẩn độ không được quá 0,5 ml.

Chì

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

Cân 2,5-3 g mẫu thử (chính xác đến 0,1 mg) đã được sấy tại 105oC trong 4 giờ, cho vào bình nón 250 ml. Thêm 50 ml nước cất, hòa tan. Trung hòa dung dịch bằng dung dịch acid hydrocloric 0,1 N với chỉ thị là dung dịch phenolphtalein (TS) nếu cần. Thêm 50 ml ether và vài giọt dung dịch xanh bromophenol (TS), chuẩn độ bằng dung dịch acid hydrocloric 0,5 N, lắc bình đều khi chuẩn độ, đến khi chỉ thị bắt đầu đổi màu. Chuyển phần nước phía dưới sang bình khác. Rửa lớp ether còn lại với 10 ml nước cất, gộp phần nước rửa vào vào phần nước đã tách ra và thêm 20 ml ether vào nước rửa. Chuẩn độ tiếp bằng dung dịch acid hydrocloric 0,5 N, lắc đều.

Mỗi ml dung dịch acid hydrocloric 0,5 N tương đương với 80,11 mg C7H5KO2.

PHỤ LỤC 7

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI CALCI BENZOAT

1. Tên khác, chỉ số

Monocalcium benzoate;

INS 213

...

2. Định nghĩa

Tên hóa học

Calci benzoat

Mã số C.A.S.

2090-05-3

Công thức hóa học

Dạng khan C14H10CaO4

Dạng monohydrat C14H10CaO4.H2O

...

Công thức cấu tạo

Dạng khan

Khối lượng phân tử

Dạng khan 282,31

Dạng monohydrat 300,32

Dạng trihydrat 336,36

3. Cảm quan

Tinh thể trắng hoặc không màu, bột trắng.

...

Chất bảo quản chống vi sinh vật

5. Yêu cầu kỹ thuật

5.1. Định tính

Độ tan

Ít tan trong nước

Calci

Phải có phản ứng đặc trưng của calci.

Benzoat

...

5.2. Độ tinh khiết

Giảm khối lượng khi sấy khô

Không được quá 17,5%.

Các chất không tan trong nước

Không được quá 0,3%.

Tính acid hoặc tính kiềm

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử).

Florid

...

Chì

Không được quá 2,0 mg/kg.

Các chất clor hữu cơ

Không được quá 0,07% (tính theo Cl2).

Các chất dễ bị oxy hóa

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử).

5.3. Hàm lượng C14H10CaO4

Không được thấp hơn 99,0 % tính theo chế phẩm khan.

6. Phương pháp thử

...

Calci

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

Benzoat

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.2. Độ tinh khiết

Giảm khối lượng khi sấy khô

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

Các chất không tan trong nước

Cân 10 g (chính xác đến mg) mẫu thử, hòa tan trong 100 ml nước nóng. Lọc qua một phễu lọc Gooch đã cân bì (chính xác đến 0,2 mg). Rửa cặn bằng nước nóng. Sấy khô phễu lọc và cặn tại 105oC trong 2 giờ. Để nguội, cân và tính hàm lượng %.

Tính acid hoặc tính kiềm

Cân 2 g mẫu thử, chính xác đến mg, hòa tan trong 20 ml nước mới đun sôi để nguội. Trung hòa dung dịch này bằng dung dịch natri hydroxyd 0,1 N hoặc acid hydrocloric 0,1 N với chỉ thị là dung dịch phenolphtalein (TS). Thể tích dung dịch natri hydroxyd 0,1 N hoặc acid hydrocloric 0,1 N sử dụng không được quá 0,5 ml.

Florid

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4, phương pháp I hoặc III.

- Cân 5 g (chính xác đến mg) mẫu thử.

Chì

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

Các chất clor hữu cơ

Thử với 0,25 g mẫu thử, sử dụng 0,5 ml dung dịch acid hydrocloric 0,01 N làm đối chứng

Các chất dễ bị oxy hóa

Thêm 1,5 ml acid sulfuric vào 100 ml nước cất, đun sôi hỗn hợp, nhỏ từng giọt dung dịch kali permanganat 0,1 N đến khi dung dịch có màu hồng bền trong 15 giây. Cân 1 g mẫu, chính xác đến mg, hòa tan vào dung dịch đã chuẩn bị, còn nóng, và chuẩn độ bằng dung dịch kali permanganat 0,1 N tới khi dung dịch có màu hồng bền trong 15 giây. Thể tích dung dịch kali permanganat sử dụng để chuẩn độ không được quá 0,5 ml.

6.3. Định lượng

Cân 0,6 g mẫu thử đã được sấy khô, chính xác đến 0,1 mg. Hòa tan trong 20 ml nước và 2 ml dung dịch acid hydrocloric loãng (TS). Pha loãng bằng nước vừa đủ để thu được 100 ml. Khuấy bằng máy khuấy từ, dùng buret 50 ml thêm khoảng 30 ml dung dịch dinatri ethylendiamintetraacetat 0,05 M, sau đó thêm 15 ml dung dịch natri hydroxyd (TS), 40 mg hỗn hợp chỉ thị murexid (có thể thay bằng 0,25 g chỉ thị xanh da trời hydroxynaphtol, trong trường hợp này không thêm dung dịch xanh lục naphtol (TS)) và 3 ml dung dịch xanh lục naphtol (TS), tiến hành chuẩn độ dung dịch đến màu xanh da trời đậm.

Mỗi ml dung dịch dinatri ethylendiamintetraacetat 0,05 M tương đương với 14,116 mg C14H10CaO4.

...

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI ETHYL p-HYDROBENZOAT

1. Tên khác, chỉ số

Ethyl p-oxybenzoat; Ethylparaben

INS 214

ADI= 0 – 10 mg/kg thể trọng

2. Định nghĩa

Tên hóa học

Ethyl p-hydroxybenzoat,

...

Mã số C.A.S.

120-47-8

Công thức hóa học

C9H10O3

Công thức cấu tạo

Khối lượng phân tử

166,18

3. Cảm quan

...

4. Chức năng

Chất bảo quản

5. Yêu cầu kỹ thuật

5.1. Định tính

Độ tan

Dễ tan trong ethanol, ether và propylen glycol

Khoảng nhiệt độ nóng chảy

115oC -118oC.

...

Khoảng nóng chảy của acid p-hydroxybenzoic được điều chế từ mẫu thử là 212-217o.

5.2. Độ tinh khiết

Giảm khối lượng khi sấy khô

Không được quá 0,5 %.

Tro sunfat

Không được quá 0,05 %.

Tính acid

...

Acid p-hydroxybenzoic và acid salicylic

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử).

Chì

Không được quá 2,0 mg/kg.

5.3. Hàm lượng C9H10O3

Không được thấp hơn 99,0 % tính theo chế phẩm khan.

6. Phương pháp thử

6.1. Định tính

...

Cân chính xác 0,5 g mẫu thử. Thêm 10 ml dung dịch natri hydroxyd (TS) vào mẫu. Đun sôi mẫu thử trong khoảng 30 phút và cô dung dịch cạn bớt đến còn khoảng 5 ml. Để nguội, acid hoá bằng dung dịch acid sulfuric loãng (TS), lọc qua giấy lọc, thu lấy kết tủa trên giấy lọc và rửa kỹ kết tủa bằng nước cất. Làm khô giấy lọc trong bình hút ẩm trên acid sulfuric đặc. Đo khoảng nóng chảy của acid p-hydroxybenzoic thu được.

6.2. Độ tinh khiết

Giảm khối lượng khi sấy khô

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Không được quá 0,5% (sấy tại 80oC trong 2 giờ).

Tro sunfat

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4, phương pháp I.

- Mẫu thử : 2 g.

...

Cân 750 mg mẫu thử, thêm 15 ml nước, đun nóng ở 80o trong 1 phút, để nguội, lọc dung dịch. Dịch lọc phải có tính acid hoặc trung tính đối với chỉ thị là quỳ tím. Thêm 0,2 ml dung dịch NaOH 0,1 N và 2 giọt dung dịch đỏ methyl (TS) vào 10 ml dịch lọc. Dung dịch phải có màu vàng không có ánh hồng.

Acid p-hydroxybenzoic và acid salicylic

Cân chính xác 0,5 g mẫu thử, hoà tan trong 30 ml ether. Thêm 20 ml dung dịch natri hydrogen carbonat 1%, lắc kỹ, tách lấy lớp nước. Rửa lớp nước bằng 20 ml ether (rửa 2 lần). Thêm tiếp 5 ml acid sulfuric loãng và 30 ml ether, lắc lần nữa. Tách lấy lớp ether, thêm 10 ml nước, lắc kỹ. Lọc lớp ether. Tráng bình hứng và giấy lọc bằng một lượng nhỏ ether rồi gộp với dịch lọc cho cô quay loại bỏ dung môi. Làm khô cặn thu được trên acid sulfuric đến khối lượng không đổi. Khối lượng cặn không được vượt quá 5 mg. Hoà tan cặn trong 25 ml nước, đun nóng ở 70o, lọc và thêm vài giọt dung dịch sắt (III) clorid (TS), Dung dịch này không được xuất hiện màu tím đến tím đỏ.

Chì

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.3. Định lượng

...

Mỗi ml dung dịch natri hydroxyd 1 N tương đương với 166,18 mg C9H10O3.

PHỤ LỤC 9

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI METHYL p-HYDROXYBENZOAT

1. Tên khác, chỉ số

Methyl p-oxybenzoat; Methylparaben

INS 218

ADI = 0 - 10mg/kg thể trọng

2. Định nghĩa

...

Methyl p-hydroxybenzoat,

methyl ester của acid p-hydroxybenzoic

Mã số C.A.S.

99-76-3

Công thức hóa học

C8H8O3

Công thức cấu tạo

Khối lượng phân tử

...

3. Cảm quan

Bột tinh thể màu trắng hoặc tinh thể nhỏ không màu, hầu như không mùi.

4. Chức năng

Chất bảo quản

5. Yêu cầu kỹ thuật

5.1. Định tính

Độ tan

Ít tan trong nước, dễ tan trong ethanol và propylen glycol, tan được trong ether.

...

125oC -128oC.

p-Hydroxybenzoat

Điểm chảy của acid p-hydroxybenzoic được chuyển hoá từ mẫu thử là 212-217o.

5.2. Độ tinh khiết

Giảm khối lượng khi làm khô

Không được quá 0,5%.

Tro sunfat

Không được quá 0,05%.

...

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử).

Acid p-hydroxybenzoic và acid salicylic

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử).

Chì

Không được quá 2,0 mg/kg.

5.3. Hàm lượng C8H8O3

Không được thấp hơn 99,0 % tính theo chế phẩm khan.

6. Phương pháp thử

6.1. Định tính

...

p-Hydroxybenzoat

Cân 0,5 g mẫu thử. Thêm 10 ml natri hydroxyd (TS) vào mẫu. Đun sôi mẫu thử trong khoảng 30 phút, cô dung dịch cạn bớt đến khi còn khoảng 5 ml. Để nguội, acid hoá bằng acid sulfuric loãng (TS), lọc qua giấy lọc, thu lấy kết tủa trên giấy lọc và rửa kỹ kết tủa bằng nước cất. Làm khô giấy lọc trong bình hút ẩm với acid sulfuric đặc. Đo điểm nóng chảy của acid p-hydroxybenzoic thu được.

6.2. Độ tinh khiết

Giảm khối lượng khi làm khô

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Trên silicagel trong 5 giờ.

Tro sunfat

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4, phương pháp I (mẫu thử : 2 g).

...

Cân 750 mg mẫu thử, thêm 15 ml nước, đun nóng ở 80o trong 1 phút. Để nguội, lọc dung dịch. Dịch lọc phải có tính acid hoá hoặc trung tính với giấy quỳ. Thêm 0,2 ml dung dịch NaOH 0,1 N và 2 giọt đỏ methyl (TS) vào 10 ml dịch lọc. Dung dịch này phải có màu vàng, không có ánh hồng.

Acid p-hydroxybenzoic và acid salicylic

Cân chính xác 0,5 g mẫu thử, hoà tan trong 30 ml ether. Thêm 20 ml dung dịch natri hydrogen carbonat 1%, lắc kỹ, tách lấy lớp nước. Rửa lớp nước bằng 20 ml ether (rửa 2 lần). Thêm tiếp 5ml acid sulfuric loãng và 30 ml ether, lắc lần nữa. Tách lấy lớp ether, thêm 10 ml nước, lắc kỹ. Lọc lớp ether. Tráng bình hứng và giấy lọc bằng một lượng nhỏ ether rồi gộp với dịch lọc để cất quay loại bỏ dung môi. Làm khô cặn thu được trên acid sulfuric đến khối lượng không đổi. Khối lượng cặn không được vượt quá 5 mg. Hoà tan cặn trong 25 ml nước, đun nóng ở 70o, lọc và thêm vài giọt dung dịch sắt (III) clorid (TS), Dung dịch này không được xuất hiện màu tím đến tím đỏ.

Chì

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.3. Định lượng

...

Mỗi ml dung dịch natri hydroxyd 1N tương đương với 152,2 mg C8H8O3.

PHỤ LỤC 10

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI LƯU HUỲNH DIOXYD

1. Tên khác, chỉ số

INS 220

ADI = 0 - 0,7 mg/kg thể trọng

2. Định nghĩa

Mã số C.A.S.

...

Công thức cấu tạo

SO2

Khối lượng phân tử

64,07

3. Cảm quan

Là chất khí, không màu, không cháy, mùi hăng mạnh, gây khó thở.Tỷ trọng hơi gấp 2,26 lần so với không khí tại áp suất khí quyển ở 0oC. Trọng lượng riêng của chất lỏng khỏang 1,436 ở 0o/4oC. Ở 20oC độ tan là 10 g SO2/100 g dung dịch. Chế phẩm thương mại thường được cung cấp dưới dạng khí nén, trong bình khí nén tồn tại ở cả 2 pha lỏng và khí.

Chú ý: Khí SO2 gây kích ứng mắt, họng và đường hô hấp trên. Lưu huỳnh dioxyd lỏng có thể gây bỏng da do tác dụng gây đông đặc các dịch trong mô. Các cảnh báo an toàn trong tài liệu kỹ thuật của nhà sản xuất, nhà cung cấp khí SO2 hóa lỏng hoặc các tổ chức của các nhà sản xuất, phân phối khí SO2 hóa lỏng cần được tuân thủ trước khi thao tác với khí SO2.

4. Chức năng

Chất bảo quản, chất chống ngả màu nâu, chất chống oxy hóa.

...

5.1. Định tính

Độ tan

Tan trong nước (36/1, tt/tt) và ethanol (114/1, tt/tt) (thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1 - Vol. 4).

Các hợp chất sulfurơ

Phải có phản ứng đặc trưng với hợp chất sulfurơ.

Hoạt tính oxy hóa

Phải có phản ứng hoạt tính oxy hóa đặc trưng.

5.2. Độ tinh khiết

...

Nước

Không được quá 0,05%.

Cặn không bay hơi

Không được quá 0,05%.

Selen

Không được quá 20,0 mg/kg.

Chì

Không được quá 5,0 mg/kg.

5.3. Hàm lượng SO2

...

6. Phương pháp thử

6.1. Định tính

Các hợp chất sulfurơ

Mẫu thử sẽ làm đen giấy tẩm ướt bằng dung dịch thủy ngân (I) nitrat (TS).

Hoạt tính oxy hóa

Cho miếng giấy lọc đã tẩm kali iodat và dung dịch hồ tinh bột (TS) vào luồng mẫu khí. Màu xanh lơ sẽ xuất hiện trên giấy, màu sẽ nhạt dần nếu vẫn để miếng giấy lọc trong mẫu khí.

6.2. Độ tinh khiết

...

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Chuyển khoảng 50 ml lưu huỳnh dioxyd lỏng vào bình chuẩn độ Karl-Fischer, xác định khối lượng mẫu đã lấy, xác định hàm lượng nước bằng phương pháp Karl-Fischer.

Cặn không bay hơi

Lấy khoảng 200 ml lưu huỳnh dioxyd (288 g) vào bình nón 250 ml. Xác định khối lượng mẫu đã lấy bằng cách xác định sự thay đổi khối lượng của bom khí. Cho bay hơi đến khô trên bể cách thủy và đuổi hết khí SO2 bằng cách sục không khí khô, lau khô thành bình, để nguội trong bình hút ẩm và cân.

Selen

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4, phương pháp II (lượng dịch thử : 2,0 ml)

- Hướng dẫn lấy mẫu và chuẩn bị mẫu mô tả trong phần Phương pháp thử.

Chì

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

6.3. Lấy mẫu

Mẫu lưu huỳnh dioxyd có thể lấy một cách an toàn từ bồn chứa hay ống dẫn thông qua một van có vòi 1 cm. Mẫu được chứa vào bom khí chế tạo từ thép không rỉ 316 chịu dược áp suất 7MPa (1000 psig) 2 đầu gắn với van kim cũng bằng thép không rỉ 316. Trước khi lấy mẫu bom chứa mẫu được thổi không khí khô qua để đuổi hết khí SO2 (có thể còn dư từ mẫu trước đó). Nối bom chứa mẫu với bồn chứa hay ống dẫn bằng một nối cứng. Đầu còn lại của bom chứa mẫu nối với một ống mềm nhúng ngập trong dung dịch xút loãng hoặc nước. Khí trong bom sẽ được xả vào dung dịch xút loãng hoặc nước khi mở van khí gắn với ống nối cứng và sau đó từ từ mở van nối với ống mềm. Khi khí ra hết khỏi bom và lưu huỳnh dioxyd lỏng bắt đầu vào dung dịch xút loãng hoặc nước, thì khóa van nối với ống mềm, sau đó từ từ khóa van nối với ống nối cứng và tách bom mẫu ra khỏi ống nối với bồn chứa hay ống dẫn. Sau đó xả khoảng 15% lượng lưu huỳnh dioxyd lỏng trong bom ra dung dịch xút loãng hoặc nước, đậy kín nắp đầu bom và chuyển bom đến phòng thí nghiệm để phân tích.

Cảnh báo: Không bao giờ để bom mẫu chứa chất lỏng có thể tích vượt quá 85% tổng dung tích của bom.

Dung dịch thử để xác định chì và selen: Lấy 100 ml lưu huỳnh dioxyd (144 g) vào bình nón 125 ml. Xác định khối lượng mẫu đã lấy bằng cách xác định khối lượng mất đi của bom mẫu. Cho bay hơi đến khô trên bể cách thủy. Thêm vào bình nón khô 3 ml acid nitric và 10 ml nước cất, đun nhẹ trên bếp trong 15 phút. Chuyển toàn bộ dịch trong bình nón vào bình định mức 100 ml, định mức đến vạch bằng nước cất, lắc đều. Lấy 10,0 ml sang một bình định mức 100ml thứ hai, định mức đến vạch bằng nước cất, lắc đều.

Chú ý: Các phép thử có sử dụng dung dịch này sẽ chính xác nếu lượng mẫu lấy đúng 144 g, nếu không đúng thì khi tính toán phải sử dụng khối lượng mẫu thực tế đã lấy.

6.4. Định lượng

Lấy 100% trừ đi hàm lượng (%) của cặn không bay hơi và nước nêu trên, thu được hàm lượng % của lưu huỳnh dioxyd.

...

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI NATRI SULFIT

1. Tên khác, chỉ số

Disodium sulfite;

INS 221

ADI=0 - 0,7 mg/kg thể trọng tính theo SO2

2. Định nghĩa

Tên hóa học

Natri sulfit

...

7757-83-7

Công thức hóa học

Na2SO3

Khối lượng phân tử

126,04

3. Cảm quan

Bột trắng có mùi lưu huỳnh dioxyd nhẹ.

4. Chức năng

Chất tẩy trắng, chất chống oxy hóa, chất bảo quản

...

5.1. Định tính

Độ tan

Dễ tan trong nước, khó tan trong ethanol.

Natri

Phải có phản ứng đặc trưng của natri.

Sulfit

Phải có phản ứng đặc trưng của sulfit.

5.2. Độ tinh khiết

...

Dung dịch 1/10 phải có pH trong khoảng 8,5-10,0.

Thiosulfat

Không được quá 0,1%.

Sắt

Không được quá 10,0 mg/kg.

Chì

Không được quá 2,0 mg/kg.

Selen

...

5.3. Hàm lượng Na2SO3

Không được thấp hơn 95,0%

6. Phương pháp thử

6.1. Định tính

Natri

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

Sulfit

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

Thiosulfat

Khi acid hóa dung dịch mẫu thử 10% bằng acid sulfuric hoặc acid hydrocloric, dung dịch phải trong.

Sắt

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Sử dụng 0,5 ml dung dịch chuẩn (5 mg Fe) làm đối chứng.

Chì

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

Thuốc thử:

Acid hydrocloric, hydrazin sulfat, dung dịch chuẩn selen (100 mg Se/ml)

Tiến hành:

Cân 2,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào cốc có mỏ 50 ml. Thêm 10 ml nước cất, 5 ml acid hydrocloric và đun sôi để đuổi hết SO2.

Cân 1,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào một cốc có mỏ thứ 2, thêm 0,05 ml dung dịch selen chuẩn và tiến hành như trên.

Thêm vào mỗi cốc 2 g hydrazin sulfat và đun nhẹ để hòa tan. Để yên trong 5 phút. Pha loãng dung dịch trong các cốc tới 50 ml trong các ống so màu Nessler, so sánh màu của 2 ống. Màu hồng của ống thử phải nhạt hơn màu của ống chứng (có thêm chuẩn).

6.3. Định lượng

...

Mỗi ml dung dịch iod 0,1 N tương đương với 6,302 mg Na2SO3.

PHỤ LỤC 12

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI NATRI HYDROSULFIT

1. Tên khác, chỉ số

Sodium hydrogen sulfite;

INS 222

ADI =0 - 0,7 mg/kg thể trọng tính theo SO2

2. Định nghĩa

...

Natri hydrosulfit, natri bisulfit

Mã số C.A.S.

7631-90-5

Công thức hóa học

NaHSO3

Khối lượng phân tử

104,06

3. Cảm quan

Bột, hạt hoặc tinh thể trắng có mùi đặc trưng của lưu huỳnh dioxyd.

...

Chất tẩy trắng, chất chống oxy hóa, chất bảo quản

5. Yêu cầu kỹ thuật

5.1. Định tính

Độ tan

Dễ tan trong nước, khó tan trong ethanol.

Natri

Phải có phản ứng đặc trưng của natri.

Sulfit

...

5.2. Độ tinh khiết

Tạp chất không tan trong nước

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử).

Dung dịch 1/10 phải có pH trong khoảng 2,5-4,5.

Sắt

Không được quá 10,0 mg/kg.

Chì

...

Selen

Không được quá 5mg/kg.

5.3. Hàm lượng SO2

Không được thấp hơn 58,5% và không được quá 67,4% tính theo SO2

6. Phương pháp thử

6.1. Định tính

Natri

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.2. Độ tinh khiết

Tạp chất không tan trong nước

Hoà tan 20 g mẫu thử trong 200 ml nước cất, dung dịch phải trong, chỉ được phép có rất ít cặn lơ lửng.

Sắt

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Sử dụng 0,5 ml dung dịch chuẩn (5mg Fe) làm đối chứng.

Chì

...

Selen

Thuốc thử:

Acid hydrocloric, hydrazin sulfat, dung dịch chuẩn selen (100 mg Se/ml)

Tiến hành:

Cân 2,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào cốc có mỏ 50 ml. Thêm 10 ml nước cất, 5 ml acid hydrocloric và đun sôi để đuổi hết SO2.

Cân 1,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào một cốc có mỏ khác, thêm 0,05 ml dung dịch selen chuẩn và tiến hành như trên.

Thêm vào mỗi cốc 2 g hydrazin sulfat và đun nhẹ để hòa tan. Để yên trong 5 phút. Pha loãng dung dịch trong các cốc thành 50 ml trong các ống so màu Nessler, so sánh màu của 2 ống. Màu hồng của ống thử phải nhạt hơn màu của ống chứng (có thêm chuẩn).

6.3. Định lượng

...

Cân 0,2 g mẫu thử, chính xác đến mg, cho vào bình có nút thủy tinh và thêm 50 ml dung dịch iod 0,1 N, đậy nút. Để yên trong 5 phút, thêm 1ml acid hydrocloric, chuẩn độ iod dư bằng dung dịch natri thiosulfat 0,1 N với chỉ thị là dung dịch hồ tinh bột (TS).

Mỗi ml dung dịch iod 0,1 N tương đương với 3,203 mg SO2.

PHỤ LỤC 13

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI NATRI META BISULFIT

1. Tên khác, chỉ số

Sodium metabisulfite;

INS 223

ADI = 0 - 0,7mg/kg thể trọng tính theo SO2

...

Tên hóa học

Natri disulfit, dinatri pentaoxodisulfat, dinatri pyrosulfit

Mã số C.A.S.

7681-57-4

Công thức hóa học

Na2S2O5

Khối lượng phân tử

190,11

...

Bột tinh thể hoặc tinh thể trắng có mùi đặc trưng của lưu huỳnh dioxyd.

4. Chức năng

Chất tẩy trắng, chất chống oxy hóa, chất xử lý bột, chất bảo quản

5. Yêu cầu kỹ thuật

5.1. Định tính

Độ tan

Dễ tan trong nước, khó tan trong ethanol.

Natri

...

Sulfit

Phải có phản ứng đặc trưng của sulfit.

5.2. Độ tinh khiết

Tạp chất không tan trong nước

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử).

Dung dịch 1/10 phải có pH trong khoảng 4,0-4,5.

Thiosulfat

...

Sắt

Không được quá 10,0 mg/kg.

Chì

Không được quá 2,0 mg/kg.

Selen

Không được quá 5,0 mg/kg.

5.3. Hàm lượng Na2S2O5

Không được thấp hơn 90,0%

6. Phương pháp thử

...

Natri

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

Sulfit

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.2. Độ tinh khiết

Tạp chất không tan trong nước

Hoà tan 20g mẫu thử trong 200 ml nước cất, dung dịch phải trong, chỉ được phép có rất ít cặn lơ lửng.

...

Dung dịch mẫu thử 10% sau khi acid hóa bằng acid sulfuric hoặc acid hydrocloric phải trong

Sắt

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Sử dụng 0,5 ml dung dịch chuẩn (5mg Fe) làm đối chứng.

Chì

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

Selen

Thuốc thử:

...

Tiến hành:

Cân 2,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào cốc có mỏ 50 ml. Thêm 10ml nước cất, 5 ml acid hydrocloric và đun sôi để đuổi hết SO2.

Cân 1,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào một cốc có mỏ khác, thêm 0,05 ml dung dịch selen chuẩn và tiến hành như trên.

6.3. Định lượng

Cân 0,2 g mẫu thử, chính xác đến mg, cho vào bình có nút thủy tinh và thêm 50 ml dung dịch iod 0,1 N, đậy nút. Để yên trong 5 phút, thêm 1 ml acid hydrocloric, chuẩn độ iod dư bằng dung dịch natri thiosulfat 0,1 N với chỉ thị là dung dịch hồ tinh bột (TS).

Mỗi ml dung dịch iod 0,1 N tương đương với 4,753 mg Na2S2O5.

...

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI KALI META BISULFIT

1. Tên khác, chỉ số

Potassium metabisulfite;

INS 224

ADI=0 - 0,7 mg/kg thể trọng tính theo SO2

2. Định nghĩa

Tên hóa học

Kali disulfit, kali pentaoxodisulfat, kali pyrosulfit

...

16731-55-8

Công thức hóa học

K2S2O5

Khối lượng phân tử

222,33

3. Cảm quan

Hạt, bột tinh thể hoặc tinh thể không màu, trơn chảy, thường có mùi đặc trưng của lưu huỳnh dioxyd.

4. Chức năng

Chất tẩy trắng, chất chống oxy hóa, chất bảo quản

...

5.1. Định tính

Độ tan

Tan trong nước, không tan trong ethanol.

Kali

Phải có phản ứng đặc trưng của kali.

Sulfit

Phải có phản ứng đặc trưng của sulfit.

5.2. Độ tinh khiết

...

Tạp chất không tan trong nước

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử).

Thiosulfat

Không được quá 0,1%.

Sắt

Không được quá 10,0 mg/kg.

Chì

Không được quá 2,0 mg/kg.

Selen

...

5.3. Hàm lượng K2S2O5

Không được thấp hơn 90,0%

6. Phương pháp thử

6.1. Định tính

Kali

Phải có phản ứng đặc trưng của kali.

Sulfit

Phải có phản ứng đặc trưng của sulfit.

...

Tạp chất không tan trong nước

Hoà tan 20 g mẫu thử trong 200 ml nước cất, dung dịch phải trong, chỉ được phép có rất ít cặn lơ lửng.

Thiosulfat

Dung dịch mẫu thử 10% không được thay đổi độ trong sau khi acid hóa bằng acid sulfuric hoặc acid hydrocloric.

Sắt

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Sử dụng 0,5 ml dung dịch chuẩn (5 mg Fe) làm đối chứng.

Chì

...

Selen

Thuốc thử:

Acid hydrocloric, hydrazin sulfat, dung dịch chuẩn selen (100 mg Se/ml)

Tiến hành:

Cân 2,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào cốc có mỏ 50 ml. Thêm 10 ml nước cất, 5 ml acid hydrocloric và đun sôi để đuổi hết SO2.

Cân 1,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào một cốc có mỏ khác, thêm 0,05 ml dung dịch selen chuẩn và tiến hành như trên.

6.3. Định lượng

...

Cân 250 mg mẫu thử cho vào bình có nút thủy tinh và thêm 50 ml dung dịch iod 0,1 N, đậy nút. Để yên trong 5 phút, thêm 1 ml dung dịch acid hydrocloric loãng (TS), chuẩn độ iod dư bằng dung dịch natri thiosulfat 0,1 N với chỉ thị là dung dịch hồ tinh bột (TS).

Mỗi ml dung dịch iod 0,1 N tương đương với 5,558 mg K2S2O5.

PHỤ LỤC 15

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI KALI SULFIT

1. Tên khác, chỉ số

Potassium sulfite;

INS 225

ADI=0 - 0,7 mg/kg thể trọng tính theo SO2

...

Tên hóa học

Kali sulfit

Mã số C.A.S.

10117-38-1

Công thức hóa học

K2SO3

Khối lượng phân tử

158,25

...

Bột hoặc hạt màu trắng, không mùi.

4. Chức năng

Chất tẩy trắng, chất chống oxy hóa, chất bảo quản

5. Yêu cầu kỹ thuật

5.1. Định tính

Độ tan

Dễ tan trong nước, ít tan trong ethanol

Kali

...

Sulfit

Phải có phản ứng đặc trưng của sulfit.

5.2. Độ tinh khiết

Tính kiềm

Từ 0,25 đến 0,45% tính theo K2CO3.

Sắt

Không được quá 10,0 mg/kg.

Chì

...

Selen

Không được quá 5,0 mg/kg.

5.3. Hàm lượng K2SO3

Không được thấp hơn 90,0%

6. Phương pháp thử

6.1. Định tính

Kali

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.2. Độ tinh khiết

Tính kiềm

Hoà tan 1 g mẫu thử trong 20 ml nước cất, thêm 25 ml dung dịch hydrogen peroxyd 3% đã được trung hoà sử dụng chỉ thị là dung dịch đỏ methyl (TS). Trộn kỹ, để nguội về nhiệt độ phòng và chuẩn độ bằng acid hydrocloric 0,02 N. Tiến hành mẫu trắng sử dụng 25 ml dung dịch hydrogen peroxyd đã được trung hoà. Mỗi ml acid hydrocloric tương đương với 1,38 mg K2CO3

Sắt

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Sử dụng 0,5 ml dung dịch chuẩn (5 mg Fe) làm đối chứng.

Chì

...

Selen

Thuốc thử:

Acid hydrocloric, hydrazin sulfat, dung dịch chuẩn selen (100 mg Se/ml)

Tiến hành:

Cân 2,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào cốc có mỏ 50 ml. Thêm 10 ml nước cất, 5 ml acid hydrocloric và đun sôi để đuổi hết SO2.

Cân 1,0 ± 0,1 g mẫu thử, cho vào một cốc có mỏ khác, thêm 0,05 ml dung dịch selen chuẩn và tiến hành như trên.

6.3. Định lượng

...

Cân khoảng 0,75 g mẫu thử, chính xác đến mg, hoà tan trong hỗn hợp gồm 100 ml dung dịch iod 0,1 N và 5 ml dung dịch acid hydrocloric loãng (TS). Chuẩn độ iod dư bằng dung dịch natri thiosulfat 0,1 N với chỉ thị là dung dịch hồ tinh bột (TS).

Mỗi ml dung dịch iod 0,1 N tương đương với 7,912 mg K2SO3.

PHỤ LỤC 16

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI NISIN

1. Tên khác, chỉ số

INS 234

2. Định nghĩa

...

Nisin bao gồm nisin và muối NaCl với hoạt độ không ít hơn 900 đơn vị/mg. Chế phẩm Nisin ổn định ở nhiệt độ môi trường xung quanh và khi đun nóng trong môi trường acid (ổn định tối ưu ở pH = 3).

Mã số C.A.S.

1414-45-5

Công thức hóa học

C143H230N42O37S7

Công thức cấu tạo

Abu : acid alpha-aminobutyric, Dha : dehydroalanin,

...

Khối lượng phân tử

Khoảng 3.354

3. Cảm quan

Bột mịn, màu trắng đến màu nâu sáng

4. Chức năng

Chất bảo quản chống vi sinh vật

5. Yêu cầu kỹ thuật

5.1. Định tính

...

Tan trong nước và không tan trong các dung môi không phân cực

Phân biệt với các chất kháng khuẩn khác

Phải có phản ứng đặc trưng khác biệt với các chất kháng khuẩn khác

5.2. Độ tinh khiết

Giảm khối lượng khi sấy khô

Không được quá 3,0% (sấy ở 1050C trong 2 giờ).

Chì

Không được quá 1,0 mg/kg.

...

Salmonella : Không được có trong 25 g mẫu

Coliforms tổng số: Không được quá 30/g

Escherichia coli: Không được có trong 25 g mẫu

5.3. Hàm lượng

Không được nhỏ hơn 900 IU nisin/mg và không được nhỏ hơn 50% muối NaCl

6. Phương pháp thử

6.1. Định tính

Phân biệt với các chất kháng khuẩn khác

...

Sử dụng phương pháp định lượng dưới đây để xác định hoạt độ nisin. Xử lý nhiệt không làm giảm hoạt độ nisin. Nồng độ nisin tính toán trong mẫu đã đun sôi là 100% ± 5% giá trị định lượng. Điều chỉnh pH của dung dịch nisin tới giá trị pH = 11 bằng cách thêm dung dịch NaOH 5N. Gia nhiệt dung dịch ở 650C trong 30 phút, sau đó làm nguội. Điều chỉnh đến pH = 2 bằng cách nhỏ vào từng giọt dung dịch HCl. Xác định lại nồng độ nisin sử dụng phương pháp định lượng được miêu tả dưới đây. Hoạt tính kháng khuẩn của nisin mất hoàn toàn thấy rõ sau quá trình xử lý này.

- Khả năng tồn tại của vi khuẩn Lactococcus lactis trong môi trường có nồng độ nisin cao: Chuẩn bị nhân giống Lactococcus lactis (ATCC 11454, NCIMB 8596) trong sữa đã tách chất béo tiệt trùng (chất béo sữa < 1%) và ủ ấm trong 18 giờ, nhiệt độ 300C. Chuẩn bị một hoặc nhiều bình tam giác chứa 100 ml sữa quì, tiệt trùng ở nhiệt độ 1210C trong 15 phút. Cho 0,1 g mẫu vào sữa quì đã được tiệt trùng và để ở nhiệt độ phòng trong 2 giờ. Thêm vào 0,1 ml môi trường L.lactis và ủ ở 300C trong 24 giờ. Vi khuẩn L.lactis sẽ phát triển trong dịch mẫu có nồng độ khoảng 1.000 IU/ml; tuy nhiên, vi khuẩn L.lactis sẽ không phát triển ở các nồng độ tương tự của các chất kháng khuẩn khác. Phép thử này không phân biệt được nisin và subtilin.

6.2 Độ tinh khiết

Chì

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.2. Định lượng

...

Chuẩn bị vi khuẩn thử:

Chuyển Lactococcus lactis sbsp .cremoris (ATCC 14365, NCDO 495) được nuôi cấy hàng ngày trong sữa đã tách chất béo tiệt trùng vào bình McCartney có chứa sữa quì bằng que cấy và ủ ở nhiệt độ 300C. Chuẩn bị sữa đã chứa vi khuẩn cho phép thử bằng cách cấy 2% dịch nuôi vi khuẩn 24h vào lượng tỷ lệ phù hợp sữa đã tách béo tiệt trùng, đặt vào bể điều nhiệt ở 300C trong 90 phút. Sau đó mang dùng ngay.

Dung dịch chuẩn gốc:

Hoà tan một lượng nisin chuẩn được cân chính xác trong dung dịch acid HCl 0,02N để tạo dung dịch 5.000 đơn vị/ml. Ngay trước khi dùng, pha loãng dung dịch này bằng acid HCl 0,02 N tạo dung dịch 50 đơn vị/ml (Lưu ý: Chế phẩm nisin của hãng Sigma, St Louis, USA hoặc Fluka gồm có 2,5% nisin, hoạt độ tối thiểu 106 IU/g, có thể sử dụng làm dung dịch chuẩn gốc tương tự, là chế phẩm có tên Nisaplin của hãng Daniscom, Copenhagen, Đan Mạch).

Dung dịch mẫu:

Cân một lượng mẫu đủ để đảm bảo rằng các ống tương ứng
của mẫu phù hợp với loạt chuẩn, tức là trong những giới hạn chặt chẽ, hàm lượng nisin trong mẫu và chuẩn là như nhau. Pha loãng dung dịch mẫu bằng dung dịch acid HCl 0,02N đến nồng độ 50 đơn vị nisin/ml.

Dung dịch resazurin:

...

Cách tiến hành:

Dùng pipet hút các thể tích (0,60; 0,55; 050; 0,45; 0,41; 0,38; 0,34; 0,31; 0,28; 0,26 ml) của dung dịch mẫu 50 đơn vị/ml và dung dịch chuẩn cho vào các hàng 10 ống thử vi sinh đã được làm khô, kích thước ống 6 x 5/8 inch. Bổ sung 4,6 ml sữa đã chứa vi khuẩn vào từng ống bằng thiết bị pipet tự động. Cho thêm sữa đã chứa vi khuẩn vào từng hàng ống có cùng nồng độ không đáng kể trừ hàng có 10 ống. Đặt các ống vào bể điều nhiệt ở nhiệt độ 300C trong 15 phút, sau đó làm nguội trong bể nước đá, cùng lúc đó thêm vào 1 ml dung dịch resazurin cho mỗi ống. Việc thêm vào đó được thực hiện bởi thiết bị pipet tự động. Lắc đều các ống. Tiếp đó ủ ở nhiệt độ 300C, thời gian 3 – 5 phút trong bể điều nhiệt .

Kiểm tra các ống bằng ánh sáng huỳnh quang trong buồng tối. Ống mẫu có nồng độ cao nhất phân biệt rõ trước tiên thông qua màu sắc (chẳng hạn như chuyển từ màu xanh sang màu hoa cà) được so sánh với các ống trong dòng chuẩn để tìm ra được sự đồng màu nhất. Tìm sự phù hợp ở hai nồng độ thấp hơn kế tiếp của mẫu và chuẩn. Nội suy sự phù hợp ở các bước pha loãng một nửa. Khi các ống chuẩn đã biết hàm lượng nisin thì sẽ tính được nồng độ nisin trong dung dịch mẫu. Có được 3 nồng độ của dung dịch và trung bình của chúng. Tính hoạt độ của chế phẩm theo đơn vị IU/g.

NaCl

Cân chính xác 100 mg mẫu cho vào một bát sứ. Thêm 100 ml nước, 2 ml dung dịch dextrin 2% và 1 ml dung dịch diclorofluorescein 0,1%. Trộn đều và chuẩn độ bằng dung dịch AgNO3 0,1N cho đến khi AgCl kết vón lại và hỗn hợp có màu hồng nhạt.

NaCl (% theo trọng lượng) được tính theo công thức sau:

...

Trong đó:

V: Thể tích dung dịch AgNO3 dùng để chuẩn độ (ml)

N: Nồng độ đương lượng của dung dịch AgNO3

58,5 : Khối lượng phân tử của NaCl

W: Khối lượng mẫu (mg)

PHỤ LỤC 17

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI HEXAMETHYLEN TETRAMIN

1. Tên khác, chỉ số

Hexamethylenetertramine; Hexamine; Methenamine

...

ADI = 0 - 0,15 mg/kg thể trọng.

2. Định nghĩa

Tên hóa học

1,3,5,7-tetraazatricylo[3.3.1.13,7]-decan; hexamethylen- tetramin

Mã số C.A.S.

100-97-0

Công thức hóa học

C6H12N4

...

Khối lượng phân tử

140,19

3. Cảm quan

Tinh thể không màu, bóng sáng, gần như không mùi hoặc bột tinh thể màu trắng.

4. Chức năng

Chất bảo quản chống vi sinh vật.

5. Yêu cầu kỹ thuật

5.1. Định tính

...

Độ tan

Dễ tan trong nước, tan được trong ethanol.

Formaldehyd

Phải có phản ứng đặc trưng của formaldehyd.

Amoni

Phải có phản ứng đặc trưng của amoni.

5.2. Độ tinh khiết

Giảm khối lượng khi làm khô

...

Tro sulfat

Không được quá 0,05%.

Các muối amoni

Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử).

Chì

Không được quá 2,0 mg/kg.

5.3. Hàm lượng C6H12N4

Không thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm đã sấy khô.

6. Phương pháp thử

...

Formaldehyd

Đun nóng dung dịch mẫu thử 1/10 với dung dịch acid hydrocloric loãng (TS). Formaldehyd được giải phóng, nhận biết qua mùi của nó và tính chất làm đen giấy tẩm dung dịch bạc amoni nitrat (TS).

Amoni

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.2. Độ tinh khiết

Giảm khối lượng khi làm khô

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4 (làm khô trên P2O5 trong 4 giờ).

...

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4, phương pháp I (cân 2 g mẫu).

Các muối amoni

Thêm 1 ml thuốc thử Nessler (TS) vào 10 ml dung dịch mẫu thử 5%. Màu của dung dịch không được thẫm hơn màu của hỗn hợp 1 ml thuốc thử Nessler (TS) trong 10 ml nước.

Chì

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.3. Định lượng

...

Mỗi ml acid sulfuric 1 N tương đương với 35,05 mg C6H12N4.

PHỤ LỤC 18

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬĐỐI VỚI DIMETHYL DICARBONAT

1. Tên khác, chỉ số

Dimethyl dicarbonate; DMDC, dimethyl pyrocarbonat

INS 242

2. Định nghĩa

Tên hóa học

...

Mã số C.A.S.

004-525-33-1

Công thức hóa học

C4H6O5

Công thức cấu tạo

Khối lượng phân tử

139,09

3. Cảm quan

...

Chú ý: có tính ăn mòn với mắt và da, gây độc qua đường hô hấp và tiêu hóa. Phải bảo quản trong bao bì kín để tránh ẩm.

4. Chức năng

Chất bảo quản

5. Yêu cầu kỹ thuật

5.1. Định tính

Độ tan

Tan trong nước kèm theo phân hủy, có thể hòa lẫn với toluen.

Hấp thụ hồng ngoại

...

5.2. Độ tinh khiết

Dimethyl carbonat

Không được quá 0,2%.

Chì

Không được quá 2,0 mg/kg.

5.3. Hàm lượng C4H6O5

Không được thấp hơn 99,8%

6. Phương pháp thử

...

Dimethyl carbonat

Thiết bị:

Máy sắc ký khí với detector ion hóa ngọn lửa (FID), cột sắc ký mao quản, bộ phận inlet cho kỹ thuật "on column" (VD Carlo Erba Fraktovap 4160, hoặc Hewlett-Packard 5880 hoặc 5792 hoặc các thiết bị khác tương đương).

- Cột mao quản: 50 m SE 30-D (đường kính trong 0,3 mm).

- Máy ghi (đo) thế, 1mV

- Microsyring với kim tiêm thạch anh, dung tích 0,01ml, phù hợp

Điều kiện hoạt động của thiết bị

Nhiệt độ:

...

- Deterctor: 200oC.

- Cột: Nhiệt độ ban đầu 30oC; giữ nhiệt độ trong 5 phút, sau đó tăng nhiệt độ lên 120oC với tốc độ 40oC/phút, giữ tại 120oC trong 5 phút.

Khí mang:

- Áp suất van sơ cấp: 3,0 bar (heli)

- Tốc độ dòng qua cột: 11 ml/phút

- Tốc độ dòng khí make up: 28ml/phút

- Tốc độ khí hydro: 35 ml/phút

- Tốc độ không khí nén: 300 ml/phút

Tốc độ máy ghi: 1 cm/phút

...

Methylisobutylketon, tinh khiết sắc ký.

Tiến hành:

Cân khoảng 10 g mẫu, chính xác đến mg (lượng cân chính xác là w1 mg), cho vào 1 lọ đựng mẫu. Thêm 1 lượng (W2 mg) dimethyl-isobutyl keton tương đương với hàm lượng ước đoán của dimethyl carbonat. Đậy kín lọ, lắc kỹ và bơm vào máy sắc ký 0,002 ml.

Thời gian lưu thu được như sau:

dimethyl carbonat: ~ 2 phút

methyl-isobutyl keton: ~4,5 phút

dimethyl-isobutyl keton: ~8 phút.

Sắc ký đồ mẫu ở phần 7.2

Xác định diện tích pic, tính hàm lượng (%) dimethyl carbonat theo công thức:

...

trong đó:

F1: Diện tích pic dimethyl carbonat

F2: Diện tích pic chuẩn

K: Hệ số hiệu chỉnh cho dimethyl carbonat

Chú ý:

1. Dimethyl dicarbonat nhạy với độ ẩm và nhiệt.

2. Nếu pic sắc ký bị chẻ đôi trong những điều kiện sắc ký nào đó, diện tích pic được xác định bằng tổng diện tích của 2 pic.

3. Hệ số hiệu chỉnh đối với dimethyl carbonat được xác định khi đo dung dịch Dimethyl dicarbonat không chứa dimethyl carbonat.

4. Mẫu đã trộn chuẩn cần phân tích ngay.

...

Chì

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.2. Định lượng

Lấy khoảng 70 ml aceton tinh khiết vào cốc thủy tinh dung tích 150 ml. Dùng syring lấy khoảng 1,0-1,3 g mẫu, mẫu cần cân chính xác đến 0,1 mg, cho vào cốc thủy tinh. Dùng pipet lấy chính xác 20 ml dung dịch dibutyl amin (thêm clorobenzen vào 120 g dibutyl amin đến đủ 1 l), cho vào cốc thủy tinh, khuấy đều. Chuẩn độ với acid hydrocloric 1 N, xác định điểm tương đương bằng đo thế. Tiến hành đồng thời một mẫu trắng.

Tính hàm lượng dimethyl dicarbonat theo công thức sau:

trong đó:

V1: Lượng acid hydrocloric chuẩn độ mẫu thử (ml)

...

t: Nồng độ dung dịch acid hydrocloric

W: khối lượng mẫu (g)

7. Phổ và sắc ký đồ đối chiếu

7.1. Phổ hồng ngoại chuẩn

7.2. Sắc ký đồ

PHỤ LỤC 19

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI ACID PROPIONIC

...

Propionic acid; acid propanoic; ethylformic acid; methylacetic acid

INS 280

ADI “không giới hạn”

2. Định nghĩa

Tên hóa học

Acid propionic

Mã số C.A.S.

79-09-4

...

C3H6O2

Công thức cấu tạo

Khối lượng phân tử

74,08

3. Cảm quan

Dung dịch sánh, có mùi hăng nhẹ

4. Chức năng

Chất bảo quản, chống nấm, chống đặc quánh, hương liệu

...

5.1. Định tính

Độ tan

Có thể trộn lẫn với nước và ethanol.

Khối lượng riêng

d2020 = 0,993 – 0,997.

5.2. Độ tinh khiết

Khoảng chưng cất

...

Cặn không bay hơi

Không được quá 0,01% (khi sấy ở 1400C đến khối lượng không đổi)

Acid formic

Không được quá 0,1 %.

Các aldehyd

Không được quá 0,2 % (tính theo propionaldehyd)

Chì

Không được quá 2,0 mg/kg.

5.3. Hàm lượng C3H6O2

...

6. Phương pháp thử

6.1. Độ tinh khiết

Acid formic

Hòa tan 15 g natri hydroxyd trong 50 ml nước, làm nguội và thêm 6 ml nước brom, khuấy để hòa tan hoàn toàn, pha loãng bằng nước đến đủ 2000 ml. Lấy 25 ml dung dịch này vào một bình nón 250 ml nút mài có chứa 100 ml nước, thêm 10 ml dung dịch natri acetat 1/5 và 10,0 ml mẫu thử. Để yên 15 phút, thêm 5 ml dung dịch kali iodid 1/4 và 10 ml acid hydrocloric. Chuẩn độ bằng dung dịch natri thiosulfat 0,1 N đến khi dung dịch mất màu nâu. Tiến hành làm mẫu trắng song song. Sự chênh lệch giữa thể tích dung dịch natri thiosulfat 0,1 N chuẩn độ mẫu thử so với mẫu trắng không được quá 4,4 ml.

Các aldehyd

Chuyển 10,0 ml mẫu thử vào bình nón 250 ml nút mài đã chứa sẵn 50 ml nước và 10,0 ml dung dịch natri bisulfit 1/8. Đậy nút và lắc đều, để yên hỗn hợp trong 30 phút. Tiến hành làm mẫu trắng song song. Sau đó chuẩn độ mẫu trắng với dung dịch iod 0,1 N đến khi màu dung dịch bắt đầu có màu nâu và và tiếp tục chuẩn độ bình thử đến khi có màu tương đương với màu của bình trắng. Sự chênh lệch giữa thể tích dung dịch iod 0,1 N chuẩn độ mẫu thử so với mẫu trắng không được quá 7,0 ml.

Chì

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

6.2. Định lượng

Cân khoảng 3 g (chính xác đến 0,1 mg) mẫu thử, hòa tan trong 50 ml nước trong bình 250 ml, thêm dung dịch phenolphtalein (TS) và chuẩn độ với dung dịch natri hydroxyd 1 N đến khi dung dịch bắt đầu có màu hồng nhạt bền trong 30 giây.

Mỗi ml dung dịch natri hydroxyd 1 N tương đương với 74,08 mg C3H6O2.

PHỤ LỤC 20

YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI NATRI PROPIONAT

1. Tên khác, chỉ số

Sodium propionate; Sodium propanoate;

...

ADI “không giới hạn”

2. Định nghĩa

Tên hóa học

Natri propionat

Mã số C.A.S.

137-40-6

Công thức phân tử

C3H5NaO2

...

Khối lượng phân tử

96,06

3. Cảm quan

Tinh thể trắng hoặc không màu, dễ hút ẩm, có mùi đặc trưng rất nhẹ.

4. Chức năng

Chất bảo quản, chống nấm, chống đặc quánh.

5. Yêu cầu kỹ thuật

5.1. Định tính

...

Độ tan

Dễ tan trong nước, tan được trong ethanol.

Natri

Phải có phản ứng đặc trưng của natri.

Propionat

Phải có phản ứng đặc trưng của propionat.

Muối kiềm của acid hữu cơ

Phải có phản ứng đặc trưng của muối kiềm của acid hữu cơ.

5.2. Độ tinh khiết

...

Giảm khối lượng khi làm khô

Không được quá 4,0 %.

Dung dịch mẫu thử 1/10 có pH trong khoảng 7,5 - 10,5.

Chất không tan trong nước

Không được quá 0,1 %.

Sắt

Không được quá 50,0 mg/kg.

Chì

...

5.3. Hàm lượng C3H6NaO2

Không thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm đã làm khô.

6. Phương pháp thử

6.1. Định tính

Natri

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

Propionat

Làm nóng mẫu bằng acid sulfuric ; acid propionic thoát ra có thể nhận biết bởi mùi đặc trưng.

...

Nung mẫu thử ở nhiệt độ tương đối thấp. Cặn còn lại có tính kiềm và sủi bọt với acid.

6.2. Độ tinh khiết

Giảm khối lượng khi làm khô

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4 (sấy tại 105o trong 2 giờ).

Chất không tan trong nước

Cân 5 g (chính xác đến mg) mẫu thử, cho vào cốc 100 ml và thêm 50 ml nước. Khuấy đến khi mẫu thử tan hoàn toàn. Lọc qua chén lọc Gooch đã cân bì (cân chính xác đến ±0,2 mg). Rửa cốc bằng 20 ml nước. Sấy khô chén lọc chứa phần không tan trong tủ sấy tại 60o đến khối lượng không đổi. để nguôi trong bình hút ẩm, cân và tính hàm lượng %.

Sắt

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

Chì

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.3. Định lượng

Cân khoảng 3 g (chính xác đến mg) mẫu thử đã được sấy khô tại 105o trong 1 giờ, thêm 200 ml dung dịch acid phosphoric 50%. Đun sôi trong 2 giờ, thu lấy dịch cất. Trong suốt quá trình cất, duy trì thể tích dịch trong bình cất khoảng 200 ml bằng cách bổ sung thêm nước qua một phễu nhỏ giọt. Chuẩn độ dịch cất với dung dịch natri hydroxyd 1 N, sử dụng chỉ thị là dung dịch phenolphtalein đến khi dung dịch bắt đầu có màu hồng nhạt bền trong 30 giây.

Mỗi ml dung dịch natri hydroxyd 1 N tương đương với 96,06 mg C3H6NaO2.

PHỤ LỤC 21

...

1. Tên khác, chỉ số

Sodium hyposulfite;

INS 539

ADI = 0 - 0,7 mg/kg thể trọng

2. Định nghĩa

Tên hóa học

Natri thiosulfat

Mã số C.A.S.

...

Công thức hóa học

Na2S2O3.5H2O

Khối lượng phân tử

248,17

3. Cảm quan

Tinh thể không màu, hoặc bột tinh thể thô, chảy rữa trong không khí ẩm và lên hoa tại nhiệt độ > 33o trong không khí khô.

4. Chức năng

Chất bảo quản, chống biến màu, chất chống oxy hóa, chất tạo phức kim loại.

5. Yêu cầu kỹ thuật

...

Độ tan

Rất dễ tan trong nước, không tan trong ethanol

Hoạt tính khử

Phải có phản ứng khử đặc trưng.

Natri

Phải có phản ứng đặc trưng của natri.

Thiosulfat

Phải có phản ứng đặc trưng của thiosulfat.

...

Giảm khối lượng khi làm khô

32 - 37% (sấy tại 40-45o dưới chân không trong 16 giờ).

Sắt

Không được quá 10,0 mg/kg.

Selen

Không được quá 5,0 mg/kg.

Chì

Không được quá 2,0 mg/kg.

...

Không thấp hơn 99,0% tính theo chế phẩm đã làm khô.

6. Phương pháp thử

6.1. Định tính

Hoạt tính khử

Thêm vào ung dịch mẫu thử 1/10 và giọt dung dịch iod (TS). Màu của dung dịch iod sẽ mất.

Natri

Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

Thiosulfat

...

6.2. Độ tinh khiết

Sắt

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Sử dụng 0,5 ml dung dịch chuẩn sắt (5mg sắt) làm mẫu chứng.

Selen

Thuốc thử

Acid hydrocloric, hydrazin sulfat, dung dịch chuẩn selen (100mg Se/ml).

Tiến hành thử

...

Cân 1 g ± 0,1 g mẫu thử, cho và một cốc thứ hai, thêm 0,05 ml dung dịch chuẩn selen

Thêm và cả hai cốc: 10 ml nước, 5 ml acid hydrocloric và đun sôi để loại bỏ hết SO2; Sau đó thêm 2 g hydrazin sulfat và làm ấm dung dung dịch (trong cả 2 cốc) để hòa tan hoàn toàn. Pha loãng 2 dung dịch bằng nước đến đủ 50 ml và cho vào 2 ống Nessler, so màu hai dung dịch. Màu hồng của dung dịch mẫu nhạt hơn màu của dung dịch mẫu thêm chuẩn.

Chì

- Thử theo JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.3. Định lượng

Cân khoảng khoảng 0,5 g (chính xác đến mg) mẫu thử. Hòa tan trong 30 ml nước. Chuẩn độ với dung dịch iod 0,1 N, dùng chỉ thị là dung dịch hồ tình bột (TS). Tiến hành làm mẫu trắng song song.

...

1.1.	Annex 1:	Specifications and tests for acid sorbic
1.2.	Annex 2:	Specifications and tests for potassium sorbate
1.3.	Annex 3:	Specifications and tests for calcium sorbate
1.4.	Annex 4:	Specifications and tests for benzoic acid
1.5.	Annex 5:	Specifications and tests for sodium benzoate
1.6.	Annex 6:	Specifications and tests for potassium benzoate
1.7.	Annex 7:	Specifications and tests for calcium benzoate
1.8.	Annex 8:	Specifications and tests for ethyl p-hydroxybenzoate
1.9	Annex 9:	Specifications and tests for methyl p-hydroxybenzoate
1.10	Annex 10:	Specifications and tests for sulfur dioxide
1.11	Annex 11:	Specifications and tests for sodium sulfite
1.12	Annex 12:	Specifications and tests for hydrogen sulfite
1.13	Annex 13:	Specifications and tests for sodium metabisulfite
1.14	Annex 14:	Specifications and tests for potassium metabisulfite
1.15	Annex 15:	Specifications and tests for potassium sulfite
1.16	Annex 16:	Specifications and tests for nisin
1.17	Annex 17:	Specifications and tests for hexamethylene tertramine
1.18	Annex 18:	Specifications and tests for dimethyl dicarbonate
1.19	Annex 19:	Specifications and tests for propionic acid
1.20	Annex 20:	Specifications and tests for sodium propionate
1.21	Annex 21:	Specifications and tests for sodium hyposulfite

2. Specifications and tests for sodium nitrate and potassium nitrate used as preservatives are specified in QCVN 4-5 :2010/BYT promulgated together with the Circular No. 22/2010/TT-BYT dated May 20, 2010 of the Minister of Health.

3. Specifications specified in this Regulation are tested under JECFA monograph 1 - Vol. 4, except for some specific tests described in the annexes. The tests provided in this Regulation are optional. Other equivalent tests may be used.

4. Sampling adheres to the guidelines in the Circular No. 16/2009/TT-BKHCN dated June 02, 2009 by the Ministry of Science and Technology and relevant regulations of law.

III. REGULATORY REQUIREMENTS

1. Declaration of conformity

1.1. Conformity of preservatives shall be declared in accordance with the regulations set out in this Regulation.

1.2. Methods and procedures for declaration of conformity shall comply with the Regulation on certification and declaration of conformity with regulations and standards under the Decision No. 24/2007/QĐ-BKHCN dated September 28, 2007 of the Minister of Science and Technology and regulations of laws.

2. Inspection of preservatives

The quality, hygiene and safety of flavour enhancers must be inspected in accordance with the regulations of law.

...

1. Entities must declare conformity according to the specifications mentioned in this Regulation, register their declarations of conformity at the Vietnam Food Administration and ensure the quality, hygiene and safety as declared.

2. Entities are only entitled to import, export, produce, sell and use flavour enhancers as declared after their completion of registration of declarations of conformity and their compliance with regulations of law on quality, hygiene, safety and labeling.

V. IMPLEMENTATION

1. The Vietnam Food Administration shall preside over and cooperate with competent authorities concerned to provide guidance on and organize the implementation of this Regulation.

2. The Vietnam Food Administration shall, according to its managerial duties, suggest amendments to this Regulation to the Ministry of Health.

3. In the cases where any of the international guidelines for tests and regulations of law referred to in this Regulation is amended or replaced, the newest one shall apply.

ANNEX 1

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR ACID SORBIC

1. Synonyms

...

INS 200

ADI = 0 – 25 mg/kg bw

2. Definition

Chemical names

Acid sorbic; acid 2,4-hexadienoic; acid 2-propenylacrylic

C.A.S. number

110-44-1

Chemical formula

...

Structural formula

Formula weight

112.12

3. Description

Colourless needles or white free flowing powder, having a slight characteristic odour.

4. Functional uses

Antimicrobial preservative, fungistatic agent

5. Specifications

...

Solubility

Slightly soluble in water, soluble in ethanol.

Melting range

Between 132 and 135^oC (the melting apparatus should be preheated to 125º before introducing the sample).

Spectrophotometry

A 1 in 400,000 solution in isopropanol solution shows absorbance maximum at 254±2 nm

Test for double bond

Passes test.

...

Water

Not more than 0.5%.

Sulfated ash

Not more than 0.2%.

Aldehydes

Not more than 0.1% (as formaldehyde).

Lead

Not more than 2 mg/kg.

...

Not less than 99.0% calculated on the anhydrous basis.

6. Tests

6.1. Identification

Test for double bond

Shake about 0.02 g of the sample with 1 ml bromine TS; the colour disappears

6.2. Purity

Water

...

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol.4.

Sulfated ash

- Test 2 g of the sample.

- Tested according to method I, JECFA monograph 1 - Vol.4.

Aldehydes

To 1 ml of a saturated aqueous solution of the sample, add 0.5 ml of Schiff's reagent TS and allow to stand for 10-15 min. Compare the colour with that produced by 1 ml of formaldehyde solution (containing 2 µg) with the same amount of Schiff's reagent under the same conditions. The colour of the test solution should not be more intense than that of the formaldehyde solution.

Lead

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol.4.

- Determine using an atomic absorption technique appropriate to the specified level. The selection of sample size and method of sample preparation may be based on the principles of the method described in JECFA monograph 1 - Vol.4, “Instrumental Methods.”

...

Dissolve about 0.25 g of the sample, accurately weighed, in 50 ml of anhydrous methanol previously neutralized with 0.1 N sodium hydroxide, add phenolphthalein TS, and titrate with 0.1 N sodium hydroxide to the first pink colour which persists for at least 30 sec.

Each ml of 0.1 N sodium hydroxide is equivalent to 11.21 mg of C6H8O2.

ANNEX 2

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR POTASSIUM SORBATE

1. Synonyms

Potassium sorbate

...

ADI = 0 – 25 mg/kg bw

2. Definition

Chemical names

Potassium sorbate, potassium salt of trans, trans-2,4-hexadienoic acid

C.A.S. number

24634-16-5

Chemical formula

C6H7KO2

...

Formula weight

150.22

3. Description

White or yellowish-white crystals or crystalline powder or granules.

4. Functional uses

Preservative

5. Specifications

5.1. Identification

...

Solubility

Freely soluble in water; soluble in ethanol.

Test for potassium

Passes test.

Melting range of sorbic acid derived from the sample

132-135^oC.

Test for unsaturation

Passes test.

5.2. Purity

...

Loss on drying

Not more than 1%.

Acidity or alkalinity

Not more than about 1% (as sorbic acid or potassium carbonate).

Aldehydes

Not more than 0.1% (as formaldehyde).

Lead

Not more than 2 mg/kg.

5.3. C6H7KO2 content

...

6. Tests

6.1. Identification

Test for potassium

Tested according to JECFA monograph 1 - Vol.4.

Melting range of sorbic acid derived from the sample

Acidify a solution of the sample with dilute hydrochloric acid TS. Collect the precipitated sorbic acid on a filter paper, wash free of chloride with water and dry under vacuum over sulfuric acid.

Test for unsaturation

To 2 ml of a 1 in 10 solution of the sample, add a few drops of bromine TS. The colour of the bromine disappears.

...

Loss on drying

Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4. (105º, 3 h).

Acidity or alkalinity

Dissolve 1.1 g of the sample in 20 ml of water and add 3 drops of phenolphthalein TS. If the solution is colourless, titrate with 0.1 N sodium hydroxide to a pink colour that persists for 15 sec. Not more than 1.1 ml should be required.

If the solution is pink in colour titrate with 0.1 N hydrochloric acid. Not more than 0.8 ml should be required to discharge the pink colour.

Aldehydes

Prepare a 0.3% solution of the sample, adjust the pH to 4 with 1N HCl and filter. To 5 ml of the filtrate add 2.5 ml of Schiff's reagent TS and allow to stand for 10 - 15 min. Compare the colour with that produced by 5 ml of a control solution containing 15 µg of formaldehyde instead of the sample. The colour of the test solution should not be more intense than that of the control solution.

Lead

...

6.3. Method of essay

Weigh, to the nearest 0.1 mg, 0.25 g of the sample, previously dried at 105º for 3 h. Dissolve in 36 ml of glacial acetic acid and 4 ml acetic anhydride in a 250-ml glass-stoppered flask, warming to effect solution. Cool to room temperature, add 2 drops of crystal violet TS and titrate with 0.1 N perchloric acid in glacial acetic acid to a blue-green end point which persists for at least 30 sec. Perform a blank determination and make any necessary correction.

Each ml of 0.1 N perchloric acid is equivalent to 15.02 mg of C6H7KO2.

ANNEX 3

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR CALCIUM SORBATE

...

Calcium sorbate

INS 203

ADI = 0 - 25 mg/kg bw

2. Definition

Chemical names

Calcium sorbate; calcium salt of trans, trans-2,4-hexadienoic acid.

C.A.S. number

7492-55-9

...

C12H14CaO4

Structural formula

Formula weight

262.32

3. Description

Fine white crystalline powder not showing any change in colour after heating at 105^oC for 90 min.

4. Functional uses

Preservative

...

5.1. Identification

Solubility

Soluble in water; practically insoluble in ethanol.

Test for calcium

Passes test.

Melting range of sorbic acid derived from the sample

132-135oC.

Test for unsaturation

...

5.2. Purity

Loss on drying

Not more than 3%.

Fluoride

Not more than 10 mg/kg.

Aldehydes

Not more than 0.1% (as formaldehyde).

Lead

...

5.3. C12H14CaO4 content

Not less than 98% and not more than 102% at the dried basis.

6. Tests

6.1. Identification

Test for calcium

Tested according to JECFA monograph 1 - Vol.4.

Melting range of sorbic acid derived from the sample

Acidify a solution of the sample with dilute hydrochloric acid TS. Collect the precipitated sorbic acid on a filter paper, wash free of chloride with water and dry under vacuum over sulfuric acid.

...

To 2 ml of a 1 in 10 solution of the sample, add a few drops of bromine TS. The colour of the bromine disappears.

6.2. Purity

Loss on drying

Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4. (over sulfuric acid in vacuum, 4h).

Fluoride

Tested according to method I, JECFA monograph 1 - Vol.4 (weigh 5 g of the sample to the nearest mg and proceed as directed in the Fluoride Limit Test (Method I or III).

Aldehydes

...

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol.4.

6.3. Method of essay

Weigh to the nearest mg, 0.25 g of the dried sample. Dissolve in 35 ml of glacial acetic acid and 4 ml of acetic anhydride in a 250-ml glass-stoppered flask, warming to effect solution. Cool to room temperature, add 2 drops of crystal violet TS and titrate with 0.1 N perchloric acid in glacial acetic acid to a blue-green end point which persists for at least 30 sec. Perform a blank determination and make any necessary correction.

Each ml of 0.1 N perchloric acid is equivalent to 13.12 mg of C12H14CaO4.

ANNEX 4

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR BENZOIC ACID

...

Benzoic acid

INS 210

ADI = 0 – 5 mg/kg bw

2. Definition

Chemical names

Benzoic acid, benzenecarboxylic acid, phenylcarboxylic acid

C.A.S. number

...

Chemical formula

C7H6O2

Structural formula

Formula weight

122.12

3. Description

White crystalline solid, usually in the form of scales or needles, having not more than a faint characteristic odour.

4. Functional uses

...

5. Specifications

5.1. Identification

Solubility

Slightly soluble in water, freely soluble in ethanol

Melting range

121^oC -123^oC

Test for benzoate

Passes test.

...

About 4.0 (solution in water)

5.2. Purity

Loss on drying

Not more than 0.5%.

Sublimation test

Passes test (described in “Tests”).

Sulfated ash

Not more than 0.05%.

...

Not more than 2 mg/kg.

Readily carbonizable substances

Passes test (described in “Tests”).

Chlorinated organic compounds

Not more than 0.07% (as Cl2).

Readily oxidizable substances

Passes test (described in “Tests”).

5.3. C7H6O2 content

Not less than 99.5% on the dried basis.

...

6.1. Identification

Test for benzoate

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol.4.

- Use 0.1 g of the sample with 0.1 g of calcium carbonate and 5 ml of water.

6.2. Purity

Loss on drying

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol.4.

...

Sublimation test

Place a small amount of the sample in a dry test tube. Wrap the test tube about 4 cm from the bottom with moistened filter paper. Heat the test tube over a low flame. Benzoic acid sublimes and crystals deposit in the colder part of the test tube leaving no residue at the bottom.

Lead

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol.4.

Readily carbonizable substances

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol.4.

- Dissolve 0.5 g of the sample, weighed to the nearest mg, in 5 ml of sulfuric acid TS. The colour produced should not be darker than a light pink (Matching Fluid Q).

Chlorinated organic compounds

...

Readily oxidizable substances

Add 1.5 ml of sulfuric acid to 100 ml of water, heat to boiling and add 0.1N potassium permanganate in drops, until the pink colour persists for 30 sec. Dissolve 1 g of the sample, weighed to the nearest mg, in the heated solution, and titrate with 0.1N potassium permanganate to a pink colour that persists for 15 sec. Not more than 0.5 ml should be required.

6.3. Method of essay

Weigh, to the nearest mg, 2.5 g of the dried sample. Dissolve in 15 ml of warm ethanol previously neutralized using phenol red TS as indicator. Add 20 ml of water and titrate with 0.5N sodium hydroxide, using phenolphthalein TS as indicator.

Each ml 0.5N sodium hydroxide is equivalent to 61.06 mg of C7H6O2.

ANNEX 5

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR SODIUM BENZOATE

...

Sodium benzoate;

INS 211

ADI = 0 - 5 mg/kg bw

2. Definition

Chemical names

Benzoic acid, benzenecarboxylic acid, phenylcarboxylic acid

C.A.S. number

532-32-1

...

C7H5NaO2

Structural formula

Formula weight

144.11

3. Description

White, almost odourless, crystalline powder, flakes or granules

4. Functional uses

Antimicrobial preservative

...

5.1. Identification

Solubility

Freely soluble in water, sparingly soluble in ethanol.

Test for sodium

Passes test.

Test for benzoate

Passes test.

5.2. Purity

...

Loss on drying

Not more than 1.5%.

Acidity or alkalinity

Passes test (described in “Tests”).

Readily carbonizable substances

Passes test (described in “Tests”).

Chlorinated organic compounds

Not more than 0.07% (as Cl2).

Readily oxidizable substances

...

Lead

Not more than 2 mg/kg.

5.3. C7H5NaO2 content

Not less than 99.0% calculated on the anhydrous basis.

6. Tests

6.1. Identification

Test for sodium

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol.4.

...

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol.4.

- Use a 10% solution of the sample

6.2. Purity

Loss on drying

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- 105^oC, 4 h.

Acidity or alkalinity

Dissolve 2 g of the sample, weighed to the nearest mg, in 20 ml of freshly boiled water. Not more than 0.5 ml of either 0.1N sodium hydroxide or 0.1N hydrochloric acid should be required for neutralization, using phenolphthalein TS as indicator.

...

Dissolve 0.5 g of the sample, weighed to the nearest mg, in 5 ml of sulfuric acid TS. The colour produced should not be darker than a light pink ("Matching Fluid Q") (Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4).

Chlorinated organic compounds

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol.4.

- Test 0.25 g of the sample using 0.5 ml of 0.01N hydrochloric acid in the control.

Readily oxidizable substances

Add 1.5 ml of sulfuric acid to 100 ml of water, heat to boiling and add 0.1N potassium permanganate, dropwise, until the pink colour persists for 30 sec. Dissolve 1 g of the sample, weighed to the nearest mg, in the heated solution, and titrate with 0.1N potassium permanganate to a pink colour that persists for 15 sec. Not more than 0.5 ml should be required.

Lead

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol.4.

...

Weigh, to the nearest mg, 3 g of the sample previously dried for 4 h at 105^oC and transfer to a 250-ml Erlenmeyer flask. Add 50 ml of water to dissolve the sample. Neutralize the solution, if necessary, with 0.1N hydrochloric acid, using phenolphthalein TS as indicator. Add 50 ml of ether and a few drops of bromophenol blue TS, and titrate with 0.5N hydrochloric acid, shaking the flask constantly, until the colour of the indicator begins to change. Transfer the lower aqueous layer to another flask. Wash the ethereal layer with 10 ml of water, and add the washing and an additional 20 ml of ether to the separated aqueous layer. Complete the titration with the 0.5N hydrochloric acid, shaking constantly the flask.

Each ml of 0.5N hydrochloric acid is equivalent to 72.05 mg of C7H5NaO2.

ANNEX 6

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR POTASIUM BENZOATE

1. Synonyms

Potasium benzoate;

INS 212

...

2. Definition

Chemical names

Potassium benzoate, potassium salt of benzenecarboxylic acid, potassium salt of phenylcarboxylic acid

C.A.S. number

582-25-2 (anhydrous)

Chemical formula

C7H5KO2.3H2O

Structural formula

...

Formula weight

160.22 (anhydrous C7H5KO2)

214.27 (trihydrate C7H5KO2.3H2O)

3. Description

White crystalline powder

4. Functional uses

Antimicrobial preservative

5. Specifications

5.1. Identification

...

Solubility

Freely soluble in water, soluble in ethanol.

Test for potassium

Passes test.

Test for benzoate

Passes test.

5.2. Purity

Loss on drying

...

Acidity or alkalinity

Passes test (described in “Tests”).

Readily carbonizable substances

Passes test (described in “Tests”).

Chlorinated organic compounds

Not more than 0.07% (as Cl2).

Readily oxidizable substances

Passes test (described in “Tests”).

Lead

...

5.3. C7H5KO2 content

Not less than 99.0% calculated on the anhydrous basis.

6. Tests

6.1. Identification

Test for potassium

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Use a 10% solution of the sample.

Test for benzoate

...

- Use a 10% solution of the sample.

6.2. Purity

Loss on drying

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- 105^oC, 4 h.

Acidity or alkalinity

Readily carbonizable substances

...

- Dissolve 0.5 g of the sample, weighed to the nearest mg, in 5 ml of sulfuric acid TS. The colour produced should not be darker than a light pink (Matching Fluid Q).

Chlorinated organic compounds

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Test 0.25 g of the sample using 0.5 ml of 0.01N hydrochloric acid in the control.

Readily oxidizable substances

Lead

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

Weigh to the nearest 0.1 mg, 2.5 to 3 g of the dried sample, and transfer to a 250-ml Erlenmeyer flask. Add 50 ml of water to dissolve the sample. Neutralize the solution, if necessary, with 0.1N hydrochloric acid, using phenolphthalein TS as indicator. Add 50 ml of ether and a few drops of bromophenol blue TS, and titrate with 0.5N hydrochloric acid, shaking the flask constantly, until the colour of the indicator begins to change. Transfer the lower aqueous layer to another flask. Wash the ethereal layer with 10 ml of water, and add the washing and an additional 20 ml of ether to the separated aqueous layer. Complete the titration with the 0.5N hydrochloric acid, shaking constantly the flask.

Each ml of 0.5N hydrochloric acid is equivalent to 80.11 mg of C7H5KO2.

ANNEX 7

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR CALCIUM BENZOATE

1. Synonyms

Monocalcium benzoate;

INS 213

...

2. Definition

Chemical names

Calcium benzoate

C.A.S. number

2090-05-3

Chemical formula

Anhydrous: C14H10CaO4

Monohydrate: C14H10CaO4.H2O

...

Structural formula

Anhydrous

Formula weight

Anhydrous: 282.31

Monohydrate: 300.32

Trihydrate: 336.36

3. Description

White or colourless crystals, or white powder.

...

Antimicrobial preservative

5. Specifications

5.1. Identification

Solubility

Sparingly soluble in water

Test for calcium

Passes test.

Test for benzoate

...

5.2. Purity

Loss on drying

Not more than 17.5%.

Water insoluble matter

Not more than 0.3%.

Acidity or alkalinity

Passes test (described in “Tests”).

Fluoride

...

Lead

Not more than 2 mg/kg.

Chlorinated organic compounds

Not more than 0.07% (as Cl2).

Readily oxidizable substances

Passes test (described in “Tests”).

5.3. C14H10CaO4 content

Not less than 99.0% calculated on the anhydrous basis.

6. Tests

...

Test for calcium

Tested according to JECFA monograph 1 - Vol.4.

Test for benzoate

Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.2. Purity

Loss on drying

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

Water insoluble matter

Dissolve 10 g of the sample, weighed to the nearest mg, in 100 ml of hot water. Filter through a Gooch crucible, tared to an accuracy of ±0.2 mg, and wash any residue with hot water. Dry the crucible for 2 h at 105ºC. Cool, weigh and calculate as percentage.

Acidity or alkalinity

Fluoride

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4, Method I or III.

- Weigh 5 g of the sample to the nearest mg.

Lead

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

Chlorinated organic compounds

Test 0.25 g of the sample using 0.5 ml of 0.01N hydrochloric acid in the control.

Readily oxidizable substances

Add 1.5 ml of sulfuric acid to 100 ml of water, heat to boiling and add 0.1N potassium permanganate in drops, until the pink colour persists for 15 sec. Dissolve 1 g of the sample, weighed to the nearest mg, in the heated solution, and titrate with 0.1N potassium permanganate to a pink colour that persists for 15 sec. Not more than 0.5 ml should be required.

6.3. Method of essay

Weigh accurately 0.6 g of the dried sample, dissolve in a mixture of 20 ml of water and 2 ml of dilute hydrochloric acid TS, and dilute to 100 ml with water. While stirring (preferably with a magnetic stirrer) add about 30 ml of 0.05M disodium ethylenediaminetetraacetate from a 50-ml buret, then add 15 ml of sodium hydroxide TS, 40 mg of murexide indicator preparation (an alternative indicator is hydroxynaphthol blue, of which 0.25 g is used - in this case the naphthol green TS is omitted) and 3 ml of naphthol green TS, and continue the titration until the solution is deep blue in colour.

Each ml of 0.05M disodium ethylenediamine tetraacetate is equivalent to 14.116 mg of C14H10CaO4.

...

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR ETHYL p-HYDROXYBENZOATE

1. Synonyms

Ethyl p-oxybenzoate; Ethylparaben

INS 214

ADI= 0 – 10 mg/kg bw

2. Definition

Chemical names

Ethyl p-hydroxybenzoate, ethyl ester of p-hydroxybenzoic acid

...

C.A.S. number

120-47-8

Chemical formula

C9H10O3

Structural formula

Formula weight

166.18

3. Description

...

4. Functional uses

Preservative

5. Specifications

5.1. Identification

Solubility

Freely soluble in ethanol, ether and propylene glycol.

Melting range

115^oC -118^oC.

...

Melting range of p-hydroxybenzoic acid derived from the sample is 212- 217^o.

5.2. Purity

Loss on drying

Not more than 0.5%.

Sulfated ash

Not more than 0.05%.

Acidity

...

p-Hydroxybenzoic acid and salicylic acid

Passes test (described in “Tests”).

Lead

Not more than 2 mg/kg.

5.3. C9H10O3 content

Not less than 99.0% calculated on the anhydrous basis.

6. Tests

6.1. Identification

...

To 0.5 g of the sample add 10 ml of sodium hydroxide TS. Boil for 30 min and concentrate to about 5 ml. Cool, acidify with dilute sulfuric acid TS, collect the precipitate on a filter, and wash thoroughly with water. Dry in a desiccator over sulfuric acid. Determine the melting range of phydroxybenzoic acid so obtained.

6.2. Purity

Loss on drying

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Not more than 0.5% (80º, 2 h).

Sulfated ash

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4, Method I.

- Test 2 g of the sample.

...

Heat 750 mg of the sample with 15 ml of water at 80o for 1 min, cool, and filter. The filtrate should be acid or neutral to litmus. To 10 ml of the filtrate add 0.2 ml of 0.1 N sodium hydroxide and 2 drops of methyl red TS. The solution should be yellow without even a light cast of pink.

p-Hydroxybenzoic acid and salicylic acid

Dissolve 0.5 g of the sample, accurately weighed, in 30 ml of ether, add 20 ml of a 1 in 100 sodium hydrogen carbonate solution, shake, and separate the water layer. Wash the water layer with two 20 ml portions of ether, add 5 ml of dilute sulfuric acid and 30 ml of ether, and shake. Separate the ether layer, and shake with about 10 ml of water. Filter the ether layer, and wash the vessel and the filter with a small amount of ether. Combine the washings and the filtrate, evaporate ether on a water bath, and dry the residue over sulfuric acid to constant weight. The weight of the residue should not exceed 5 mg. Dissolve any residue in 25 ml of water, heat to about 70o , filter, and add a few drops of dilute ferric chloride TS. No violet to reddish violet colour should be produced.

Lead

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.3. Method of essay

...

Each ml of N sodium hydroxide is equivalent to 166.18 mg of C9H10O3.

ANNEX 9

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR METHYL p-HYDROXYBENZOATE

1. Synonyms

Methyl p-oxybenzoate; Methylparaben

INS 218

ADI = 0 - 10mg/kg bw

2. Definition

...

Methyl p-hydroxybenzoate, methyl ester of p-hydroxybenzoic acid

C.A.S. number

99-76-3

Chemical formula

C8H8O3

Structural formula

Formula weight

...

3. Description

Almost odourless, small, colourless crystals or a white, crystalline powder.

4. Functional uses

Preservative

5. Specifications

5.1. Identification

Solubility

Slightly soluble in water; freely soluble in ethanol and propylene glycol; soluble in ether.

...

125oC -128oC.

Test for p-hydroxybenzoate

Melting range of p-hydroxybenzoic acid derived from the sample is 212- 217o.

5.2. Purity

Loss on drying

Not more than 0.5%.

Sulfated ash

Not more than 0.05%.

...

Passes test (described in “Tests”).

p-Hydroxybenzoic acid and salicylic acid

Passes test (described in “Tests”).

Lead

Not more than 2 mg/kg.

5.3. C8H8O3 content

Not less than 99.0% calculated on the anhydrous basis.

6. Tests

6.1. Identification

...

Test for p-hydroxybenzoate

6.2. Purity

Loss on drying

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Over silica gel, 5 h.

Sulfated ash

Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4, Method I (Test 2 g of the sample).

...

p-Hydroxybenzoic acid and salicylic acid

Dissolve 0.5 g of the sample, accurately weighed, in 30 ml of ether, add 20 ml of a 1 in 100 sodium hydrogen carbonate solution, shake, and separate the water layer.

Wash the water layer with two 20 ml portions of ether, add 5 ml of dilute sulfuric acid and 30 ml of ether, and shake. Separate the ether layer, and shake with about 10 ml of water.Filter the ether layer, and wash the vessel and the filter with a small amount of ether. Combine the washings and the filtrate, evaporate ether on a water bath, and dry the residue over sulfuric acid to constant weight. The weight of the residue should not exceed 5 mg. Dissolve any residue in 25 ml of water, heat to about 70o , filter, and add a few drops of dilute ferric chloride TS. No violet to reddish violet colour should be produced.

Lead

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.3. Method of essay

...

Weigh, to the nearest mg, 2 g of the dried sample and transfer into a flask. Add 40 ml of N sodium hydroxide and rinse the sides of the flask with water. Cover with a watch glass, boil gently for 1 h and cool. Add 5 drops of bromothymol blue TS and titrate the excess sodium hydroxide with N sulfuric acid, comparing the colour with a buffer solution TS (pH 6.5) containing the same proportion of indicator. Perform a blank determination with the reagents and make any necessary correction.

Each ml of N sodium hydroxide is equivalent to 152.2 mg of C8H8O3.

ANNEX 10

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR SULFUR DIOXIDE

1. Synonyms

INS 220

ADI = 0 - 0.7 mg/kg bw

2. Definition

...

7446-09-5

Structural formula

SO2

Formula weight

64.07

3. Description

Colourless, non-flammable gas, with strong, pungent, suffocating odour. Its vapour density is 2.26 times that of air at atmospheric pressure and 0^oC. The specific gravity of the liquid is about 1.436 at 0^o/4^oC. At 20^o the solubility is about 10 g of SO2 per 100 g of solution. It is normally supplied under pressure in containers in which it is present in both liquid and gaseous phases.

Caution: Sulfur dioxide gas is intensely irritating to the eyes, throat, and upper respiratory system. Liquid sulfur dioxide may cause skin burns, which result from the freezing effect of the liquid on tissue. Safety precautions to be observed in handling of the material are specified in technical brochures from liquid sulfur dioxide manufacturers, suppliers or organizations of gas manufacturers or suppliers.

4. Functional uses

...

5. Specifications

5.1. Identification

Solubility

Soluble in water (36 v in 1 v) and ethanol (114 v in 1 v) (tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4).

Test for sulfurous substances

Passes test.

Oxidizing activity

Passes test.

...

Water

Not more than 0.05%.

Non-volatile residue

Not more than 0.05%.

Selenium

Not more than 20 mg/kg.

Lead

Not more than 5 mg/kg.

...

Not less than 99.9 % SO2 by weight.

6. Tests

6.1. Identification

Test for sulfurous substances

The sample blackens filter paper moistened with mercurous nitrate TS.

Oxidizing activity

Expose a filter paper, treated with potassium iodate and starch TS, to the sample. A blue colour is developed that fades on continued exposure.

6.2. Purity

...

Water

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Transfer about 50 ml of liquid sulfur dioxide into a Karl Fischer titration jar, determine the weight of the sample taken, and determine the water content by Karl Fischer Method.

Non-volatile residue

Measure out 200 ml of sulfur dioxide (288 g) into a 250-ml Erlenmeyer flask, and determine the weight of sample taken by the loss in weight of the sample bomb. Evaporate to dryness on a steam bath, and displace the residual vapours with dry air. Wipe the flask dry, cool in a desiccator, and weigh.

Selenium

- A 2.0-ml portion of the Sample Solution meets the requirements of the Selenium Limit Test, Method II.

- For sampling and sample preparation, see “Tests”.

Lead

...

6.3. Sampling

Samples of sulfur dioxide may be safely withdrawn from a tank or transfer lines, either of which should be equipped with a 1-cm nozzle and valve. Samples should be taken in bombs constructed of 316 stainless steel, designed to withstand 7 MPa (1000 psig) and equipped with 316 stainless steel needle valves on both ends. To draw a sample, the bomb is first flushed with dry air to remove any sulfur dioxide, remaining from previous sample drawings, and then attached to the tank or transfer lines with a solid pipe connection. A hose is connected to the other end of the bomb and submerged in either a weak caustic solution or water. Any gas in the bomb is discharged into the caustic or water by first opening the valve at the pipe end, followed by slowly opening at the valve at the hose end. When all of the gas is dispelled and liquid sulfur dioxide begins to emerge into the solution, the valve at the hose end is blocked off. The other valves are then tightly closed, and the bomb is detached from the pipe connecting it to the tank or transfer line Approximately 15% of the liquid sulfur dioxide in the bomb is then discharged into the water or caustic solution. The bomb is then capped at its end and transferred to the laboratory for analysis.

Caution: The bomb should never be stored with more than 85% of the total water capacity of the bomb.

Sample Solution for the Determination of Lead, and Selenium: Measure out 100 ml of sulfur dioxide (144 g) into a 125-ml Erlenmeyer flask, and determine the weight of sample taken by the loss in weight of the sample bomb. Evaporate to dryness on a steam bath, add 3 ml of nitric acid and 10 ml of water to the dry flask, and warm gently on a hot plate for 15 min. Transfer the contents of the flask to a 100-ml volumetric flask, dilute to volume with water, and mix. Transfer a 10.0-ml aliquot into a second 100-ml volumetric flask, dilute to volume with water, and mix.

Note: The tests in which this solution is to be used will be accurate assuming a 144 g sample has been taken; if not, the weight of sample actually taken must be considered in the calculations.

6.4. Method of essay

...

ANNEX 11

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR SODIUM SULFITE

1. Synonyms

Disodium sulfite;

INS 221

ADI=0 – 0.7 mg/kg bw as SO2

2. Definition

Chemical names

...

C.A.S. number

7757-83-7

Chemical formula

Na2SO3

Formula weight

126.04

3. Description

White powder with not more than a faint odour of sulfur dioxide.

4. Functional uses

...

5. Specifications

5.1. Identification

Solubility

Freely soluble in water; sparingly soluble in ethanol.

Test for sodium

Passes test.

Test for sulfite

Passes test.

...

8.5 - 10.0 (1 in 10 soln).

Thiosulfate

Not more than 0.1%.

Iron

Not more than 10 mg/kg.

Lead

Not more than 2 mg/kg.

...

Not more than 5 mg/kg.

5.3. Na2SO3 content

Not less than 95.0%.

6. Tests

6.1. Identification

Test for sodium

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

Test for sulfite

...

6.2. Purity

Thiosulfate

A 10% solution of the sample should remain clear on acidification with sulfuric or hydrochloric acid.

Iron

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Use 0.5 ml of Iron Standard Solution (5 µg Fe) in the control.

Lead

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

Selenium

Reagents:

Hydrochloric acid, hydrazinium sulfate, standard selenium solution (100 µg Se/ml)

Procedure:

Weigh 2.0 ± 0.1 g of sample and transfer to a 50-ml beaker. Add 10 ml water, 5 ml hydrochloric acid and boil to remove SO2.

Into a second beaker, weigh 1.0 ± 0.1 g of sample, add 0.05 ml standard selenium solution and proceed as above.

To each beaker add 2 g hydrazinium sulfate and warm to dissolve. Let stand for 5 min. Dilute the contents of each beaker to 50 ml in a Nessler tube and compare the colour of the two solutions. The sample should be less pink than the sample with the added standard.

6.3. Method of essay

...

Weigh 250 mg of the sample, add to 50.0 ml of 0.1 N iodine in a glassstoppered flask, and stopper the flask. Allow to stand for 5 min, add 1 ml of hydrochloric acid and titrate the excess iodine with 0.1 N sodium thiosulfate, adding starch TS as the indicator.

Each ml of 0.1 N iodine is equivalent to 6.302 mg of Na2SO3.

ANNEX 12

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR SODIUM HYDROGEN SULFITE

1. Synonyms

Sodium hydrogen sulfite;

INS 222

ADI =0 - 0,7 mg/kg bw as SO2

2. Definition

...

Chemical names

Sodium hydrogen sulfite, sodium bisulfite

C.A.S. number

7631-90-5

Chemical formula

NaHSO3

Formula weight

104.06

3. Description

...

4. Functional uses

Antibrowning agent, antioxidant, preservative

5. Specifications

5.1. Identification

Solubility

Freely soluble in water; sparingly soluble in ethanol

Test for sodium

Passes test.

...

Passes test.

5.2. Purity

Water insolubles

Passes test (described in “Tests”).

2.5 - 4.5 (1 in 10 soln).

Iron

Not more than 10 mg/kg.

...

Not more than 2 mg/kg.

Selenium

Not more than 5mg/kg.

5.3. SO2 content

Not less than 58.5% and not more than 67.4% of SO2

6. Tests

6.1. Identification

Test for sodium

...

Test for sulfite

Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.2. Purity

Water insolubles

Dissolve 20 g of the sample in 200 ml of water. The solution should be clear with only a trace of suspended matter.

Iron

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Use 0.5 ml of Iron Standard Solution (5 µg Fe) in the control.

...

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

Selenium

Reagents:

Hydrochloric acid, hydrazinium sulfate, standard selenium solution (100 µg Se/ml)

Procedure:

Weigh 2.0 ± 0.1 g of sample and transfer to a 50-ml beaker. Add 10 ml water, 5 ml hydrochloric acid and boil to remove SO2.

Into a second beaker, weigh 1.0 ± 0.1 g of sample, add 0.05 ml standard selenium solution and proceed as above.

To each beaker add 2 g hydrazinium sulfate and warm to dissolve. Let stand for 5 min. Let stand for 5 min. Dilute the contents of each beaker to 50 ml in a Nessler tube and compare the colour of the two solutions. The sample should be less pink than the sample with the added standard.

...

Weigh 0.2 g of the sample, to the nearest mg, add 50.0 ml of 0.1 N iodine in a glass-stoppered flask, and stopper the flask. Allow to stand for 5 min, add 1 ml of hydrochloric acid, and titrate the excess iodine with 0.1 N sodium thiosulfate, adding starch TS as the indicator.

Each ml of 0.1 N iodine is equivalent to 3.203 mg of SO2.

ANNEX 13

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR SODIUM METABISULFITE

1. Synonyms

Sodium metabisulfite;

INS 223

...

2. Definition

Chemical names

Sodium disulfite, disodium pentaoxodisulfate, disodium pyrosulfite

C.A.S. number

7681-57-4

Chemical formula

Na2S2O5

Formula weight

...

3. Description

White crystals or crystalline powder having an odour of sulfur dioxide.

4. Functional uses

Antibrowning agent, antioxidant, flour treatment agent, preservative

5. Specifications

5.1. Identification

Solubility

Freely soluble in water; sparingly soluble in ethanol.

...

Passes test.

Test for sulfite

Passes test.

5.2. Purity

Water insolubles

Passes test (described in “Tests”).

4.0 - 4.5 (1 in 10 soln).

...

Not more than 0.1%.

Iron

Not more than 10 mg/kg.

Lead

Not more than 2 mg/kg.

Selenium

Not more than 5 mg/kg.

5.3. Na2S2O5 content

Not less than 90.0%.

...

6.1. Identification

Test for sodium

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

Test for sulfite

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.2. Purity

Water insolubles

...

Thiosulfate

A 10% solution of the sample should remain clear on acidification with sulfuric or hydrochloric acid.

Iron

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Use 0.5 ml of Iron Standard Solution (5 µg Fe) in the control.

Lead

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

Selenium

...

Hydrochloric acid, hydrazinium sulfate, standard selenium solution (100 µg Se/ml)

Procedure:

Weigh 2.0 ± 0.1 g of sample and transfer to a 50-ml beaker. Add 10ml ml water, 5 ml hydrochloric acid and boil to remove SO2.

Into a second beaker, weigh 1.0 ± 0.1 g of sample, add 0.05 ml standard selenium solution and proceed as above.

6.3. Method of essay

Weigh 0.2 g of the sample, to the nearest mg, add 50.0 ml of 0.1 N iodine in a glass-stoppered flask, and stopper the flask. Allow to stand for 5 min, add 1 ml of hydrochloric acid and titrate the excess iodine with 0.1 N sodium thiosulfate, adding starch TS as the indicator.

...

ANNEX 14

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR POTASSIUM METABISULFITE

1. Synonyms

Potassium metabisulfite;

INS 224

ADI=0 - 0.7 mg/kg bw as SO2

2. Definition

Chemical names

...

C.A.S. number

16731-55-8

Chemical formula

K2S2O5

Formula weight

222.33

3. Description

Colourless free-flowing crystals, crystalline powder, or granules, usually having an odour of sulfur dioxide.

4. Functional uses

...

5. Specifications

5.1. Identification

Solubility

Soluble in water; insoluble in ethanol.

Test for potassium

Passes test.

Test for sulfite

Passes test.

...

Water insolubles

Passes test (described in “Tests”).

Thiosulfate

Not more than 0.1%.

Iron

Not more than 10 mg/kg.

Lead

Not more than 2 mg/kg.

...

Not more than 5 mg/kg.

5.3. K2S2O5 content

Not less than 90.0%.

6. Tests

6.1. Identification

Test for potassium

Passes test.

Test for sulfite

...

6.2. Purity

Water insolubles

Dissolve 20 g of the sample in 200 ml of water. The solution should be clear with only a trace of suspended matter.

Thiosulfate

A 10% solution of the sample should remain clear on acidification with sulfuric or hydrochloric acid.

Iron

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Use 0.5 ml of Iron Standard Solution (5 µg Fe) in the control.

...

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol.4.

Selenium

Reagents:

Hydrochloric acid, hydrazinium sulfate, standard selenium solution (100 µg Se/ml)

Procedure:

Weigh 2.0 ± 0.1 g of sample and transfer to a 50-ml beaker. Add 10 ml water, 5 ml hydrochloric acid and boil to remove SO2.

Into a second beaker, weigh 1.0 ± 0.1 g of sample, add 0.05 ml standard selenium solution and proceed as above.

...

Weigh 250 mg of the sample, add to 50.0 ml of 0.1 N iodine in a glass stoppered flask, and stopper the flask. Allow to stand for 5 min, add 1 ml of dilute hydrochloric acid TS and titrate the excess iodine with 0.1 N sodium thiosulfate, using starch TS as the indicator.

Each ml of 0.1 N iodine is equivalent to 5.558 mg of K2S2O5.

ANNEX 15

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR POTASSIUM SULFITE

1. Synonyms

Potassium sulfite;

INS 225

...

2. Definition

Chemical names

Potassium sulfite

C.A.S. number

10117-38-1

Chemical formula

K2SO3

Formula weight

...

3. Description

White, odourless, granular powder.

4. Functional uses

Antibrowning agent, antioxidant, preservative

5. Specifications

5.1. Identification

Solubility

Freely soluble in water; slightly soluble in ethanol.

...

Passes test.

Test for sulfite

Passes test.

5.2. Purity

Alkalinity

Between 0.25 and 0.45% as K2CO3.

Iron

Not more than 10 mg/kg.

...

Not more than 2 mg/kg.

Selenium

Not more than 5 mg/kg.

5.3. K2SO3 content

Not less than 90.0%.

6. Tests

6.1. Identification

Test for potassium

...

Test for sulfite

Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.2. Purity

Alkalinity

Dissolve 1 g of the sample in 20 ml of water and add 25 ml of 3% hydrogen peroxide, previously neutralized to methyl red TS. Mix thoroughly, cool to room temperature, and titrate with 0.02 N hydrochloric acid. Perform a blank determination using 25 ml of neutralized hydrogen peroxide solution. Each ml of 0.02 N hydrochloric acid is equivalent to 1.38 mg of K2CO3.

Iron

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Use 0.5 ml of Iron Standard Solution (5 µg Fe) in the control.

...

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol.4.

Selenium

Reagents:

Hydrochloric acid, hydrazinium sulfate, standard selenium solution (100 µg Se/ml)

Procedure:

Weigh 2.0 ± 0.1 g of sample and transfer to a 50-ml beaker. Add 10 ml water, 5 ml hydrochloric acid and boil to remove SO2.

Into a second beaker, weigh 1.0 ± 0.1 g of sample, add 0.05 ml standard selenium solution and proceed as above.

...

Weigh accurately about 0.75 g of the sample and dissolve in a mixture of 100 ml of 0.1 N iodine and 5 ml of dilute hydrochloric acid TS. Titrate the excess iodine with 0.1 N sodium thiosulfate, adding starch TS as the indicator.

Each ml of 0.1 N iodine is equivalent to 7.912 mg of K2SO3.

ANNEX 16

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR NISIN

1. Synonyms

INS 234

...

Nisin is a mixture of closely related antimicrobial polypeptides produced by strains of Lactococcus lactis subsp. lactis under appropriate fermentation conditions.

Nisin preparation consists of nisin and sodium chloride with an activity of not less than 900 units per mg. Nisin preparation is stable at ambient temperatures and upon heating under acid conditions (maximum stability at pH 3).

C.A.S. number

1414-45-5

Chemical formula

C143H230N42O37S7

Structural formula

...

Dhb=dehydrobutyrine

Formula weight

Ca. 3354

3. Description

White to light brown micronized powder

4. Functional uses

Antimicrobial preservative

5. Specifications

5.1. Identification

...

Solubility

Soluble in water and insoluble in non-polar solvents

Differentiation from other antimicrobial substances

Passes test.

5.2. Purity

Loss on drying

Not more than 3.0% (105^oC , 2 h)

Lead

...

Microbiological criteria

Salmonella species: Absent in 25 g of sample

Total coliforms: Not more than 30 per gram

Escherichia coli: Absent in 25 g sample

5.3. Content

Not less than 900 IU of nisin per milligram and not less than 50% sodium chloride

6. Tests

6.1. Identification

...

- Stability to acid: Suspend a 100-mg sample in 0.02 N hydrochloric acid as described in “Standard stock solution” under Method of Assay. Boil this solution for 5 min.

Using the method of assay described below, determine the nisin activity. No significant loss of activity is noted following this heat treatment. The calculated nisin concentration of the boiled sample is 100% +/- 5% of the assay value. Adjust the pH of the nisin solution to 11.0 by adding 5N sodium hydroxide. Heat the solution at 65° for 30 min, and then cool. Adjust the pH to 2.0 by adding hydrochloric acid dropwise. Again determine the nisin concentration using the assay method described below. Complete loss of the antimicrobial activity of nisin is observed following this treatment.

- Tolerance of Lactococcus lactis to high concentrations of nisin: Prepare cultures of Lactococcus lactis (ATCC 11454, NCIMB 8586) in sterile skim m (<1% fat) milk by incubating for 18 h at 30°. Prepare one or more flasks containing 100 ml of litmus milk, and sterilize at 121° for 15 min. Suspend 0.1 g of sample in the sterilized litmus milk, and allow to stand at room temperature for 2 h. Add 0.1 ml of the L. lactis culture, and incubate at 30° for 24 h. L. lactis will grow in this concentration of sample (about 1000 IU/ml); however, it will not grow in similar concentrations of other antimicrobial substances. This test will not differentiate nisin from subtilin.

6.2. Purity

Lead

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.2. Method of essay

...

Determination of nisin activity (Based on the method of Friedman and Epstein, J. Gen. Microbiol. 5: 830, 1951)

Preparation of the test organism:

Lactococcus lactis sbsp .cremoris (ATCC 14365, NCDO 495) is subcultured daily in sterile separated milk by transferring one loopful to a McCartney bottle of litmus milk and incubating at 30^o. Prepare inoculated milk for the assay by inoculating a suitable quantity of sterile skim milk with 2 percent of a 24 h culture, and place it in a water-bath at 30^o for 90 min. Use immediately.

Standard stock solution:

Dissolve an accurately weighed quantity of standard nisin in 0.02N hydrochloric acid to give a solution containing 5 000 units/ml. Immediately before use, dilute the solution further with 0.02N hydrochloric acid to give 50 units/ml. (NOTE: Nisin preparation containing 2.5 % nisin, minimum potency of 10 6 IU/g, obtainable from Sigma, St Louis, USA or Fluka, Buchs, Switzerland, may be used for the Standard Stock Preparation, as well as, the preparation under the name of Nisaplin, available from Danisco, Copenhagen, Dennmark).

Sample solution:

Weigh an amount of sample sufficient to ensure that corresponding tubes of the sample and standard series match, i.e. within close limits, the nisin content in the sample and standard is the same. Dilute the sample solution in 0.02 N hydrochloric acid to give an estimated concentration of 50 units of nisin per ml.

...

Prepare a 0.0125% solution of resazurin in water immediately before use.

Procedure:

Pipet graded volumes (0.60, 0.55, 0.50, 0.45, 0.41, 0.38, 0.34, 0.31, 0.28, 0.26 ml) of the 50 unit per ml sample and standard solutions into rows of 10 dry 6-inches x 5/8-inch bacteriological test-tubes. Add 4.6 ml of the inoculated milk to each by means of an automatic pipetting device. The addition of inoculated milk is made in turn across each row of tubes containing the same nominal concentration, not along each row of ten tubes. Place the tubes in a water-bath at 30^o for 15 min, then cool in an ice water bath while adding 1 ml resazurin solution to each. The addition is made with an automatic pipetting device, in the same order used for the addition of inoculated milk. Thoroughly mix the contents of the tubes by shaking. Continue incubation at 30^o in a water-bath for a further 3-5 min.

Examine the tubes under fluorescent light in a black matt-finish cabinet. The sample tube of the highest concentration which shows the first clear difference in colour (i.e. has changed from blue to mauve) is compared with tubes of the standard row to find the nearest in colour. Make further matches at the next two lower concentrations of the sample and standard. Interpolation of matches may be made at half dilution steps. As the standard tubes contain known amounts of nisin, calculate the concentration of nisin in the sample solution. Obtain three readings of the solution and average them. Calculate the activity in terms of IU per gram of preparation.

NaCl

Accurately weigh about 100 mg of sample, and transfer to a porcelain casserole. Add 100 ml water, 2 ml 2% dextrin soln, and 1 ml 0.1% dichlorofluoroscein soln. Mix, and titrate with 0.1 N silver nitrate soln until the silver chloride flocculates and the mixture acquires a faint pink colour.

Sodium chloride,% (w/w):

...

Where:

V is the volume of silver nitrate solution consumed (ml)

N is the normality of the silver nitrate solution

58.5 is the formula weight of sodium chloride, and

W is the weight of the sample (mg).

ANNEX 17

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR HEXAMETHYLENE TERTRAMINE

1. Synonyms

...

INS 239

ADI = 0 - 0.15 mg/kg bw.

2. Definition

Chemical names

1,3,5,7-tetraazatricylo[3.3.1.13,7]-decan; hexamethylen- tetramin

C.A.S. number

100-97-0

Chemical formula

...

Structural formula

Formula weight

140.19

3. Description

Nearly odourless, colourless lustrous crystals, or white crystalline powder.

4. Functional uses

Antimicrobial preservative

5. Specifications

...

Solubility

Freely soluble in water, soluble in ethanol.

Test for formaldehyde

Passes test.

Ammonium

Passes test.

5.2. Purity

...

Not more than 2.0%.

Sulfated ash

Not more than 0.05%.

Test for ammonia

Passes test (described in “Tests”).

Lead

Not more than 2 mg/kg.

5.3. C6H12N4 content

Not less than 99.0% on the dried basis.

...

6.1. Identification

Test for formaldehyde

Heat a 1 in 10 solution of the sample with dilute sulfuric acid TS. Formaldehyde is liberated, recognizable by its odour and by its darkening of paper moistened with silver ammonium nitrate TS.

Ammonium

Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.2. Purity

Loss on drying

...

Sulfated ash

Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4, Method I (Test 2 g of the sample).

Test for ammonia

Add 1 ml of Nessler's reagent TS to 10 ml of a 5% solution of the sample. The mixture should not be darker than a mixture of 1 ml of the reagent in 10 ml of water.

Lead

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.3. Method of essay

...

Weigh, to the nearest 0.1 mg, 1 g of the sample, previously dried for 4 h over phosphorus pentoxide. Transfer into a beaker and add 40.00 ml of N sulfuric acid. Boil gently adding water from time to time, if necessary, until the odour of formaldehyde is no longer perceptible. Cool, add 20 ml of water, and methyl red TS and titrate the excess acid with N sodium hydroxide.

Each ml of N sulfuric acid is equivalent to 35.05 mg of C6H12N4.

ANNEX 18

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR DIMETHYL DICARBONATE

1. Synonyms

Dimethyl dicarbonate; DMDC, dimethyl pyrocarbonate

INS 242

2. Definition

...

Dimethyl dicarbonate

C.A.S. number

004-525-33-1

Chemical formula

C4H6O5

Structural formula

Formula weight

139.09

...

Colourless liquid.

Caution: Corrosive to eyes and skin and toxic by inhalation and ingestion; must be kept in a tightly sealed container to exclude moisture.

4. Functional uses

Preservative

5. Specifications

5.1. Identification

Solubility

Soluble in water with decomposition; miscible with toluene.

...

The infrared spectrum of the sample corresponds with the reference infrared spectrum below.

5.2. Purity

Dimethyl dicarbonate

Not more than 0.2%.

Lead

Not more than 2 mg/kg.

5.3. C4H6O5 content

Not less than 99.8%.

...

6.1. Purity

Dimethyl dicarbonate

Apparatus:

Gas chromatograph with a flame ionization detector, equipped for capillary gas chromatography, and inlet part for the "on column" technique (e.g., Carlo Erba Fraktovap 4160, or Hewlett-Packard 5880 or 5792).

- Capillary: 50 m SE 30-D (internal diameter: 0,3 mm).

- Potentiometric recorder, 1 mV.

- Microliter syringes with quartz needles, contents 0,010 ml, suitable

Operating conditions

...

- Injection block: Room temperature (approximately 25^o)

- Detector: 200^o.

- Capillary Tube: Initial temperature 30^o; Preliminary phase 5 min, Rate of ascent 40^o/min; Final temperature 120^o, Final phase 5 min.

Carrier gas:

- Preliminary pressure: 3.0 bar (Helium)

- Capillary tubes: Approx. 11 ml/min

- Make-up gas: 28 ml/min

- Hydrogen: 35 ml/min

- Air: 300 ml/min

...

Reagents:

Methylisobutylketone, purest grade.

Procedure:

Accurately weigh about 10 g of the sample to the nearest mg (W1 mg) into a rolled rim vial. Add in a quantity of dimethyl-isobutylketone (W2 mg), corresponding to the anticipated dimethylcarbonate content. Seal the rolled rim vial, mix well and inject 0.002 ml.

Retention times:

dimethylcarbonate: Approx. 2 min

methylisobutylketone: Approx. 4.5 min

dimethyldicarbonate: Approx. 8 min

Typical Chromatogram in 7.2

...

Where:

F1: peak area of dimethylcarbonate

F2: peak area of the standard

K: a Correction Factor for dimethylcarbonate

Remarks:

1. It should be noted the DMDC is sensitive to moisture and heat.

2. If so-called peak splits occur to some extent at the given gaschromatography conditions, then the peak areas are best determined by summation of the areas under both peaks.

3. The correction factor for dimethylcarbonate should be determined with corresponding test solutions in DMDC which is to the greatest extent possible free of dimethylcarbonate.

...

5. Hamilton syringes with Metal needles can result in a partial decomposition of the DMDC.

Lead

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- The selection of sample size and method of sample preparation may be based on the principles of the method described in JECFA monograph 1 - Vol. 4, “Instrumental Methods.”

6.2. Method of essay

Introduce about 70 ml of pure acetone into a 150-ml glass beaker. Using a disposable 2 ml syringe weigh 1.0-1.3 g of the sample to an accuracy of ±0.1 mg into the glass beaker. Pipette exactly 20 ml dibutyl amine solution (add chlorobenzene to 120 g dibutyl amine until the 1 L mark is reached) while stirring. Titrate the solution potentiometrically with 1N hydrochloric acid. Run a blank test.

Calculate the % of dimethyldicarbonate from:

Where:

...

V2 = amount of hydrochloric acid used for titration of the blank (ml)

t = normality of hydrochloric acid

W = weight of sample (g)

7. Spectrum and chromatogram

7.1. Infrared spectrum

7.2. Typical chromatogram

ANNEX 19

...

1. Synonyms

Propionic acid; propanoic acid; ethylformic acid; methylacetic acid

INS 280

ADI “Not limited”

2. Definition

Chemical names

Propionic acid

C.A.S. number

...

Chemical formula

C3H6O2

Structural formula

Formula weight

74.08

3. Description

An oily liquid with a slightly pungent odour

4. Functional uses

...

5. Specifications

5.1. Identification

Solubility

Miscible with water and ethanol.

Specific gravity

d2020 = 0.993 – 0.997.

5.2. Purity

...

138.5 - 142.5^o.

Non-volatile residue

Not more than 0.01% when dried at 140^oto constant weight

Formic acid

Not more than 0.1%.

Aldehydes

Not more than 0.2% (as propionaldehyde)

Lead

Not more than 2 mg/kg.

...

Not less than 99.5% on dried basis.

6. Tests

6.1. Purity

Formic acid

Dissolve 15 g of sodium hydroxide in 50 ml of water, cool, add 6 ml of bromine, stirring to effect complete solution, and dilute to 2,000 ml with water. Transfer 25.0 ml of this solution, into a 250 ml, glass-stoppered Erlenmeyer flask containing 100 ml of water, and add 10 ml of a 1 in 5 solution of sodium acetate and 10.0 ml of the sample. Allow to stand for 15 min, add 5 ml of a 1 in 4 solution of potassium iodide and 10 ml of hydrochloric acid, and titrate with 0.1 N sodium thiosulfate just to the disappearance of the brown colour.Perform a blank determination. The difference between the volume of 0.1 N sodium thiosulfate required for the blank and that required for the sample is not more than 4.4 ml.

Aldehydes

Transfer 10.0 ml of the sample into a 250-ml glass-stoppered conical flask containing 50 ml of water and 10.0 ml of a 1 in 8 solution of sodium bisulfite. Stopper the flask, and shake vigorously. Perform a blank determination. Allow the mixture to stand for 30 min, then titrate with 0.1N iodine to the same brownish yellow end-point obtained with a blank treated with the same quantities of the same reagents. The difference between the volume of 0.1N iodine required for the blank and that required for the sample is not more than 7 ml.

Lead

...

6.2. Method of essay

Mix 3 g of the sample, weighed to the nearest 0.1 mg, with 50 ml of water in a 250-ml flask. Add phenolphthalein TS, and titrate with 1N sodium hydroxide to the first appearance of a faint pink end-point which persists for at least 30 sec.

Each ml of 1N sodium hydroxide is equivalent to 74.08 mg of C3H6O2.

ANNEX 20

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR SODIUM PROPIONATE

1. Synonyms

...

INS 281

ADI “Not limited”

2. Definition

Chemical names

Sodium propionate

C.A.S. number

137-40-6

Chemical formula

...

Structural formula

Formula weight

96.06

3. Description

White or colourless, hygroscopic crystals with not more than a faint characteristic odour.

4. Functional uses

Preservative, antimould and antirope agent.

5. Specifications

...

Solubility

Freely soluble in water, soluble in ethanol.

Test for sodium

Passes test.

Test for propionate

Passes test.

Test for alkali salt of organic acid

Passes test.

...

Loss on drying

Not more than 4.0%.

7.5 - 10.5 (1 in 10 soln).

Water-insoluble matter

Not more than 0.1%.

Iron

Not more than 50.0 mg/kg.

...

Not more than 5 mg/kg.

5.3. C3H6NaO2 content

Not less than 99.0% on the dried basis.

6. Tests

6.1. Identification

Test for sodium

Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

Test for propionate

...

Test for alkali salt of organic acid

Ignite the sample at a relatively low temperature. The alkaline residue effervesces with acid.

6.2. Purity

Loss on drying

Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4. (105º, 2 h).

Water-insoluble matter

Weigh 5 g of the sample to the nearest mg, transfer into a 100-ml beaker and add 50 ml of water. Stir until all the sample appears to be completely dissolved. Filter through a Gooch crucible, tared to an accuracy of ± 0.2 mg. Rinse the beaker with 20 ml of water. Dry the crucible with its contents in a 60º oven to constant weight. Cool in a desiccator, weigh, and calculate as percentage.

Iron

...

- Test 0.5 g of the sample as described in the Limit Test using 2.5 ml of Iron Standard Solution (25 µg Fe) in the control.

Lead

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.3. Method of essay

Weigh, to the nearest mg, 3 g of the sample previously dried at 105º for 1 h, into a distillation flask and add 200 ml of 50% phosphoric acid. Boil for 2 h and collect the distillate. During distillation keep the volume in the flask at about 200 ml by adding water using a dropping funnel. Titrate with 1N sodium hydroxide using phenolphthalein TS as indicator to the first appearance of a faint pink end-point which persists for at least 30 sec.

Each ml of 1N sodium hydroxide corresponds to 96.06 mg of C3H5NaO2.

...

SPECIFICATIONS AND TESTS FOR SODIUM HYPOSULFITE

1. Synonyms

Sodium hyposulfite;

INS 539

ADI = 0 - 0.7 mg/kg bw

2. Definition

Chemical names

Sodium thiosulfate

...

7772-98-7

Chemical formula

Na2S2O3.5H2O

Formula weight

248.17

3. Description

Colourless crystals or coarse crystalline powder; deliquesces in moist air and effloresces in dry air above 33^o.

4. Functional uses

Antibrowning agent, antioxidant, sequestrant

...

5.1. Identification

Solubility

Very soluble in water; insoluble in ethanol

Reducing activity

Passes test.

Test for sodium

Passes test.

Thiosulfate

...

5.2. Purity

Loss on drying

32-37% (40-45^o , 16 h, under vacuum).

Iron

Not more than 10 mg/kg.

Selenium

Not more than 5 mg/kg.

Lead

...

5.3. Na2S2O3 content

Not less than 99.0% on the dried basis.

6. Tests

6.1. Identification

Reducing activity

To a 1 in 10 solution of the sample add a few drops of iodine TS; the colour is discharged.

Test for sodium

Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

...

Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.2. Purity

Iron

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

- Use 0.5 ml of Iron Standard Solution (5 µg Fe) in the control.

Selenium

Reagents

Hydrochloric acid, hydrazinium sulfate, standard selenium solution (100 µg Se/ml).

...

Weigh 2 ± 0.1 g of sample and transfer to a 50-ml beaker.

Into a second beaker, weigh 1.0 ± 0.1 g of sample, add 0.05 ml standard selenium solution and proceed as above.

To each beaker, add 10 ml water, 5 ml hydrochloric acid and boil to remove SO2; then add 2 g hydrazinium sulfate and warm to dissolve. Dilute the contents of each beaker to 50 ml in a Nessler tube and compare the colour of the two solutions. The sample should be less pink than the sample with the added standard.

Lead

- Tested according to JECFA monograph 1 - Vol. 4.

6.3. Method of essay

...

Each ml of 0.1 N iodine is equivalent to 15.81 mg of Na2S2O3.

;

Quy chuẩn kỹ thuật Quốc gia QCVN 4-12:2010/BYT về phụ gia thực phẩm - chất bảo quản do Bộ trưởng Bộ Y tế ban hành

Số hiệu:	QCVN4-12:2010/BYT
Loại văn bản:	Quy chuẩn
Nơi ban hành:	Bộ Y tế
Người ký:	***
Ngày ban hành:	22/12/2010
Ngày hiệu lực:	Đã biết
Tình trạng:	Đã biết

Văn bản được hướng dẫn - [0]

Văn bản được hợp nhất - [0]

Văn bản bị sửa đổi bổ sung - [0]

Văn bản bị đính chính - [0]

Văn bản bị thay thế - [0]

Văn bản được dẫn chiếu - [1]

Văn bản được căn cứ - [0]

Văn bản liên quan ngôn ngữ - [1]

Văn bản đang xem

Quy chuẩn kỹ thuật Quốc gia QCVN 4-12:2010/BYT về phụ gia thực phẩm - chất bảo quản do Bộ trưởng Bộ Y tế ban hành

Văn bản liên quan cùng nội dung - [10]

Văn bản hướng dẫn - [0]

Văn bản hợp nhất - [0]

Văn bản sửa đổi bổ sung - [0]

Văn bản đính chính - [0]

Văn bản thay thế - [0]

- 14 +

Tải Văn bản tiếng Việt
Tải Văn bản tiếng Anh

Chưa có Video

Hãy đăng nhập hoặc đăng ký Tài khoản để biết được tình trạng hiệu lực, tình trạng đã bị sửa đổi, bổ sung, thay thế, đính chính hay đã được hướng dẫn chưa của văn bản và thêm nhiều tiện ích khác